湖北cck8每次数据都不一样

二、优点：·使用方便，省去了洗涤细胞，不需要放射性同位素和有机溶剂；·CCK-8法能快速检测；·CCK-8法的检测灵敏度很高，甚至可以测定较低细胞密度；·CCK-8法的重复性优于MTT法，MTT实验生成的formazan不是水溶性的，需要使用DMSO等有机溶剂溶解；而本方法产生的formazan是水溶性的，不但省去了溶解步骤，更因此而减少了该操作步骤带来的误差；·CCK-8法对细胞毒性小，可以多次测定选取比较好测定时间，与MTT方法相比线性范围更宽，灵敏度更高；·CCK-8细胞活性检测试剂中为1瓶溶液，毋需预制，即开即用。使用方便，省去了洗涤细胞，不需要放射性同位素和有机溶剂.湖北cck8每次数据都不一样

细胞增殖实验就是对细胞生长的测定，常用的方法有MTT、CCK8以及流式检测。阅读大量文献发现，如果想证明一个***或者说是一个作用条件对细胞生长的影响，基本上大家都采用MTT或CCK8结合流式的双标准来证明作用效果。所以，***先给大家介绍一下MTT和CCK8比色法的实验操作和注意事项。MTT实验操作1、在96孔板中培养细胞，设置对照组（细胞+无血清培养基）、实验组和空白组（无血清培养基），可以采用如下图的排版方式：2、在对照组和实验组中，湖北cck8每次数据都不一样请问合适的种板数是怎么定义的呢?

细菌***对CCK8检测的影响：我们做***的，经常会做到细菌或***对细胞的影响。那这种情况下我们应该怎么办。其实细菌防御系统还是非常强大，单独和CCK-8在一起孵育时，不会发生还原反应，几乎不会和细菌发生显色反应。而细菌不需要入胞繁殖，所以结果还是可信的。**讨厌的就是***，我不知道有多少人是做***的。***是需要入胞繁殖的，而且需要借助细胞的东西来进行繁殖。繁殖过程中就需要消耗宿主的能量，会产生氧化还原反应，所以我用CCK-8来测定***对细胞活性的影响或者某个***对***复制的影响时，我都小心翼翼的测很多个时间点，说实话，效果不是很好。所以我比较喜欢中性红。

实验材料及试剂

96 孔板、CO2培养箱、酒精灯、移液***、酶标仪等；细胞、CCK8等。

实验内容取生长状态良好的对数生长期细胞，每孔按 4×103个接种至 96 孔板中，每组设置8个复孔，置于细胞培养箱中培养，待细胞贴壁后转染相应质粒后。继续培养 48h 后，弃含药培养基，每孔加入新鲜配制的含 10ｕL的毒性检测液CCK8，置于培养箱中继续培养 4h 后，用酶标仪测波长为450 nm的OD值。实验重复 3 次， 取实验结果的平均值作为**终实验结果。按公式计算生长***率＝[(对照组 OD－实验组 OD)/对照组 OD]  ×**，以分组为横坐标，生长***率为纵坐标，绘制细胞生长***率柱状图。 在电子耦合试剂（也就是细胞是活的，有呼吸，有能量代谢）.

摸条件包括1、种板数；2、种板后细胞的贴壁生长时间；3、加药后的孵育时间；4、cck8试剂加入量；5、cck8试剂加入后细胞孵育时间。看起来很多，其实这就是一个实验。而且都是种的空白板，也就是不加药物，只加细胞和CCK8。我没有做过MTT实验，但其实原理及目的都是一样的（反应机理不一样）。都说CCK8简单点而且数据更稳定，所以就用了这个试剂盒。

当然仁者见仁智者见智，我写的只是个人实验心得，但供参考。欢迎大家拍砖共同进步。实验是简单的，道路是曲折的，时间就是用来浪费的，科研就是自娱自乐使劲折腾。

酚红和血清对CCK法的检测不会造成干扰；湖北cck8每次数据都不一样

cck8结果处理**终结果.湖北cck8每次数据都不一样

用途：

***筛选、

细胞增殖测定、

细胞毒性测定、

**药敏试验等。

所需设备及仪器：

10ul，100-200ul及多通道移液器

酶标仪（带有450nm滤光片）

96孔培养板

二氧化碳培养箱

培养0.5-4小时:细胞种类不同，形成的Formazan的量也不一样。如果显色不够的话，可以继续培养，以确认比较好条件。特别是血液细胞形成的Formazan很少，需要较长的显色时间（5-6小时）。

测定450nm吸光度：建议采用双波长进行测定，检测波长450-490nm，参比波长600-650nm。 湖北cck8每次数据都不一样