蛋白被泛素化后（即蛋白上结合了泛素），意味着将要被运往蛋白酶体降解，一般用于降解细胞内老弱病残蛋白，再回收利用。同时也被用于排除异己，抵御外敌。该过程需要一系列酶介导：泛素***酶（E1）、泛素偶联酶（E2）和泛素E3连接酶（E3）。其中E3是起特异性识别作用的，即决定谁该被降解，不能把好同志降解掉。所以E3基因很多，植物中主要有四种类型：HECT、RING、U-box和CRLs。其中CRLs是植物中含量**丰富的E3连接酶。本研究中，通过酵母双杂交筛选到的标题蛋白MdBT2，整好是CRLs亚家族之一。因此作者推测MdBT2可能在与ApNMV1a结合后，起到了促进其泛素化和降解的作用。酵母单杂交文库筛选选欧易生物技术可靠服务高效。北京酵母文库报价
酵母单杂交测试：为验证该文库在Y2H和Y1H体系中的有效性，作者以OsMADS1为诱饵筛选水稻转录因子文库，进行了酵母双杂交测试。以Ghd7的启动子片段为诱饵，进行了酵母单杂交测试。结果显示我们的水稻转录因子文库可以有效且高通量的检测蛋白-水稻TF、DNA-水稻TF间的相互作用。另外，该研究中指出，使用该文库筛选鉴定蛋白-TF互作，采用mating法较为方便，即Y2HGold-Bait诱饵菌液与Y187-TF文库菌液一对一杂交。而筛选鉴定DNA-TF互作，采用Y1HGold系统，即Y1HGold-pomoter筛选TF文库质粒更简单高效。此外，可通过降低筛选压力处理，进行弱相互作用的检测。山西发展酵母文库欧易生物酵母平台，从公司成立伊始，伴随着公司和客户一路成长，栉风沐雨十多年。
利用酵母文库进行双杂交筛选，结果显示 MdBT2 可以与 MdRGL3a 结合。MdRGL3a 编码 GA 信号阻遏物 DELLA 蛋白，主要分布于细胞核中。MdRGL3a 对于 GA 处理非常敏感，可以引起其发生降解，PAC 处理可以提高其稳定性。进一步的酵母一对一杂交验证实验表明，两者的结合依赖于 MdBT2 的 BTB 和 BACK 结构域、MdRGL3a 的 LHRI 和 SAW motif（图 A-B）。并通过 GST pull-down、BiFC 实验也证实了 MdBT2与 MdRGL3a 的结合（图 C-D）。细胞外降解实验显示，与对照相比，MdRGL3a 与过表达 MdBT2 的愈伤组织的总蛋白共同孵育，会导致 MdRGL3a 的降解加快；而与抑制 MdBT2 表达的愈伤组织的总蛋白共同孵育，会导致 MdRGL3a 的降解减缓（图 A）。并且蛋白酶体抑制剂 MG132 可以***抑制 MdRGL3a 的降解（图 B）。改变 MdRGL3a 表达量并不影响 MdBT2 的降解。以上结果表明，MdRGL3a 可能通过 26S 蛋白酶体途径发生降解，而 MdBT2 可以抑制 MdRGL3a 的降解。
本研究通过酵母双杂交筛选，鉴定到 CRY1 可以与 SWR1 复合物关键亚基 SWC6、ARP6 结合，共同以蓝光依赖模式调控 H2A.Z 在染色质的沉积。蓝光***的 CRY1 可以增强 SWC6 与 ARP6 的相互作用。此外，HY5 也可以与 SWC6、ARP6 结合，将 SWR1 复合物募集到 HY5 靶向位置，调控 HY5 靶基因的表达，进而影响拟南芥下胚轴的伸长据此，本研究提出拟南芥光形态建成调控的分子机制：CRY1 通过增强 SWR1 复合物活性和 HY5 介导 SWR1 复合物向 HY5 靶基因的募集，共同促进 H2A.Z 染色质沉积，以调控 HY5 靶基因的表达和蓝光条件下光形态建成。酵母单双杂交服务促销季技术服务。
通过酵母双杂交文库进行了互作蛋白的筛选，结果显示TaTIFY9可以与TaSRL1相互作用（下图A），并通过Bi-FC、荧光互补实验得以证实（图B-C）。TaTIFY9属于茉莉酸信号途径关键因子JAZ家族的成员之一。RT-PCR显示TaTIFY9也主要表达于小麦根部，外源施加茉莉酸可以***诱导TaTIFY9表达。这一结果表明，TaSRL1可能通过与TIFY9结合介导了茉莉酸对根生长的抑制。已有研究表明 ERF 蛋白可以特异性结合到靶基因启动子序列中的 GCC-box 序列。TaSRL1 属于 ERF 家族。在生长素转运基因 TaPIN2 的启动子序列中含有一个 GCC-box 序列。酵母单杂交实验显示，TaSRL1 可以直接与 TaPIN2 启动子结合并***其表达（图 A），但该***作用会被TaSRL1的互作蛋白TaTIFY9 所抑制（图 B和C）。欧易生物酵母文库拥有GAL4系统、泛素系统，单杂、双杂等多种酵母杂交筛选方法。山西发展酵母文库
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酵母双杂交筛选实验：为进一步了解LEA3蛋白在干旱胁迫下调控植物生长和增强抗旱性的分子机制，本研究以干旱胁迫条件下的棉花根茎叶为材料，构建了棉花干旱胁迫酵母文库。并以GhLEA3为诱饵，采用酵母双杂交筛选实验，从棉花酵母文库中筛选获得了GhLEA3互作蛋白，并对互作蛋白进行了GO和KEGG分析，发现其中的互作蛋白GhVDAC1主要参与钙信号通路和cGMP-PKG信号通路，互作蛋白Gh***A参与多种生物途径，如糖原生成和代谢途径。此外，GhVDAC1和Gh***A受干旱胁迫诱导表达***，且在GhLEA3敲除的棉株中表达量低于野生型棉株北京酵母文库报价
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