通过酵母双杂交进行筛选,结果显示 SWC6 可以在蓝光下与 CRY1 相互作用(图 A-C)。同样,酵母双杂交实验显示 CRY2 也可以在蓝光下与 SWC6 相互作用(图 D)。并通过 pull-down、split-LUC、semi-in vivo pull-down、Co-IP 实验(图 E-L)证实 CRY1、CRY2 与 SWC6 的结合是蓝光依赖性的。SWC6 是真核生物中已报道的 SWR1 复合物亚基,负责催化 H2A.Z 在染色质上的替换。已报道 SWR1 复合物中 SWC6 可以与 ARP6 亚基结合。Pull-down、split-LUC、semi-in vivo pull-down、Co-IP 实验(图 A-H)显示,CRY1、CRY2 可以蓝光依赖性与 ARP6 结合。酵母文库能够完美解决上述的问题,且一个文库可以并不是只有一个人可以用。上海宣传酵母文库报价
通过传统的酵母双杂交系统,以PtDAL1为诱饵,筛选样本来源于不同年龄段的油松cDNA文库。将获得的阳性克隆,10个一组,挑选到1个96孔板的PCR板孔中,获得10*96个阳性克隆的96孔板。以其中阳性克隆mix为模板,进行PCR扩增,并将所有的PCR产物进行纯化。使用纯化后的PCR产物,进行打断后构建二代测序文库,通过NGS测序,获得6G的阳性克隆数据。通过分析二代测序数据,获得阳性克隆基因信息(去冗余后获得135个互作子,包含21个TFs,2个TRs及酶类、热激蛋白、RNA结合等蛋白,部分见表1)。挑选重要的候选基因进行一对一验证(图2)。与拟南芥中同源基因AGL6的蛋白互作网络进行比对分析。对DAL1互作蛋白(DIPs)的基因表达谱、启动子中的顺势作用元件功能进行分析,并对DIPs进行GO注释(图3)。综合生信分析结果,构建针叶树老化途径的调控模型(图4)。上海宣传酵母文库报价推出两套酵母双杂交文库构建体系MART体系。
水稻转录因子文库筛选服务:2021 年 10 月 12 日,中国科学院分子植物科学***创新中心王二涛研究员为通讯作者,在 Cell 上发表了题为“A phosphate starvation response-centered network regulates mycorrhizal symbiosis”的封面论文。文章***报道了水稻-丛枝菌根共生转录调控网络,发现植物直接营养吸收途径与通过丛枝菌根共生的间接营养吸收途径均受到磷信号网络的统一调控,回答了菌根共生领域“自我调节”这一困扰领域的重要科学问题。分子植物科学***创新中心博士后石进彩为***作者,欧易生物肖云平也参与了此项研究。文章中水稻转录因子文库筛选服务由欧易生物提供。
酵母双杂交文库:本研究通过蓝/红光诱导青蒿中青蒿素生物合成基因的表达,使用转录组分析确定了一个WRKY转录因子AaWRKY9,可明显***青蒿素生物合成相关基因的表达。实验表明AaWRKY9通过光依赖JA信号通路调节,在青蒿素生物合成中发挥重要作用,AaWRKY9通过与AaDBR2和AaGSW1的启动子结合正向调节青蒿素的积累。此外,JA信号通路中的抑制因子AaJAZ9与AaWRKY9相互作用,并抑制其转录***活性,而在MeJA存在情况下,AaJAZ9被降解,AaWRKY9的转录***活性增加,进而促进青蒿素生物合成基因的表达。酵母双杂交文库结果表明,AaWRKY9有助于光和JA信号调节青蒿素的生物合成,为两种信号途径在植物次生代谢物合成中的整合调控提供了新见解。酵母文库质量检测酵母基因功能鉴定。
欧易生物酵母文库技术发表的又一篇高水平研究论文。植物***茉莉酸(JA)参与植物许多发育过程的调控。JAZ蛋白是茉莉酸信号反应的阻遏物,通过抑制JA转录调节剂来负向调节JA信号。花青素和原花青素是种子、叶、花和果实中重要的植物次生代谢产物,可充当抗氧化剂,帮助***活性氧和对**老,对人类健康具有重要价值。已有研究表明,花青素和原花青素的生物合成基因的转录受MYB、basichelix-loop-helix(bHLH)及WD40蛋白的调控。其中,苹果MYB转录因子MdMYB9参与调控JA介导的花青素和原花青素的生物合成,但其分子机制仍有待深入研究。酵母双杂交文库构建实验流程。上海宣传酵母文库报价
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酵母双杂交文库:为研究松树生长时相转变和生殖发育的奥秘,本研究收集了油松 7 个年龄段的叶片进行了转录组测序。加权基因共表达网络分析(WGCNA)鉴定到一个与年龄***相关的基因模块(图 A)。按照表达模式,可以分为 2 个子模块:随年龄增长而表达上升的基因子模块、随年龄增长而表达降低的基因子模块(图 B-D)。这些基因在 5-7 年营养生长至生殖生长过渡期发生了一个明显的表达模式转变,表明在生殖发育启动阶段存在一个相对剧烈的时相转变过程。上海宣传酵母文库报价
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