通过酵母双杂交进行筛选,结果显示 SWC6 可以在蓝光下与 CRY1 相互作用(图 A-C)。同样,酵母双杂交实验显示 CRY2 也可以在蓝光下与 SWC6 相互作用(图 D)。并通过 pull-down、split-LUC、semi-in vivo pull-down、Co-IP 实验(图 E-L)证实 CRY1、CRY2 与 SWC6 的结合是蓝光依赖性的。SWC6 是真核生物中已报道的 SWR1 复合物亚基,负责催化 H2A.Z 在染色质上的替换。已报道 SWR1 复合物中 SWC6 可以与 ARP6 亚基结合。Pull-down、split-LUC、semi-in vivo pull-down、Co-IP 实验(图 A-H)显示,CRY1、CRY2 可以蓝光依赖性与 ARP6 结合。酵母文库筛库欧易生物。海南生物技术酵母文库做什么
小欧从2018年即开始关注酵母杂交与高通量测序相结合的技术发展,如2017年CaoGang老师等发表的RLL-Y2H技术,实现了文库筛文库可能,该技术通过对酵母双杂常用载体的改造,并结合高通量测序,可直接获得AD-BD互作蛋白对。所用方法相当巧妙,感兴趣的同学请点击《当酵母双杂交遇到高通量测序》。钮老师团队之前的研究已经鉴定了DAL1作为一种保守的针叶树年龄生物标记基因,在油松从营养生长到生殖生长的时相转变过程中起重要作用。为了进一步理解年龄效应如何驱动针叶树的发育,阐明与DAL1相关的蛋白互作网络很关键。钮老师团队利用传统的Y2H筛选技术结合NGS测序技术,优化得到了Y2H-seq技术,与传统的筛选测序相比,大幅度节省了时间和实验成本。陕西品质酵母文库做什么筛选酵母文库选欧易生物技术可靠服务高效多年经验。
酵母双杂交表明拟南芥AtBT2蛋白可以与AtRGA互作。与对照相比,拟南芥bt1/2双突变体幼苗高度降低,而硝酸盐处理可以进一步抑制其生长,外源施加GA可以回复其生长缺陷。在拟南芥中异源表达MdBT2可以明显提高植株高度,而PAC处理则会抑制这种生长的促进作用。在拟南芥中异源表达MdRGL3a可以明显抑制植株生长,而硝酸盐处理和MdBT2过表达则会缓解这种生长抑制作用。外源GA处理可以逆转以上对植株生长的影响(图A-D)。以上结果表明,BT蛋白通过DELLA蛋白调控植株生长,这一机制在不同的植物中具有保守性。
根系是植物从土壤中吸收水分、养分和感知环境刺激的独特***。根系结构的优化有助于提高植株的抗逆性和产量。ERF(ETHYLENERESPONSIVEFACTOR)是植物特有的转录因子家族之一,与植物的多种发育过程和抗逆性有关。ERFs在拟南芥和水稻根系发育中的作用已经多有报道,但小麦ERFs在根系发育中的作用尚待研究。报道了小麦 TaSRL1 转录因子调控根长的分子机制。文章中酵母双杂交文库由欧易生物完成。从小麦基因组中克隆了 TaSRL1 基因,RT-PCR 显示 TaSRL1 主要在小麦苗期的根中表达。对 TaSRL1 启动子序列进行预测分析。2酵母展示质量技术酵母展示技术,共收录30多个行业,涵盖多行业资料一键下载。
利用酵母文库进行双杂交筛选,结果显示 MdBT2 可以与 MdRGL3a 结合。MdRGL3a 编码 GA 信号阻遏物 DELLA 蛋白,主要分布于细胞核中。MdRGL3a 对于 GA 处理非常敏感,可以引起其发生降解,PAC 处理可以提高其稳定性。进一步的酵母一对一杂交验证实验表明,两者的结合依赖于 MdBT2 的 BTB 和 BACK 结构域、MdRGL3a 的 LHRI 和 SAW motif(图 A-B)。并通过 GST pull-down、BiFC 实验也证实了 MdBT2与 MdRGL3a 的结合(图 C-D)。细胞外降解实验显示,与对照相比,MdRGL3a 与过表达 MdBT2 的愈伤组织的总蛋白共同孵育,会导致 MdRGL3a 的降解加快;而与抑制 MdBT2 表达的愈伤组织的总蛋白共同孵育,会导致 MdRGL3a 的降解减缓(图 A)。并且蛋白酶体抑制剂 MG132 可以***抑制 MdRGL3a 的降解(图 B)。改变 MdRGL3a 表达量并不影响 MdBT2 的降解。以上结果表明,MdRGL3a 可能通过 26S 蛋白酶体途径发生降解,而 MdBT2 可以抑制 MdRGL3a 的降解。酵母文库 技术服务欧易生物分子互作一站式服务。海南生物技术酵母文库做什么
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酵母双杂交、GSTpull-down实验显示,SWC6可以直接与HY5、HYH相互作用(图A-C)。pull-down实验显示ARP6同样可以与HY5、HYH相互作用(图D)。split-LUC、Co-IP实验证实HY5可以与SWC6、ARP6结合(图E-J)。下胚轴表型分析显示,蓝光下arp6hy5hyh三突变体下胚轴长度明显大于arp6突变体、hy5hyh双突变体,表明ARP6和HY5有可能通过不同途径调控下胚轴的发育。Semi-in vivo pull-down、Co-IP 实验显示,蓝光下,在 CRY1 存在下,SWC6 与 ARP6 的结合***增强。表明蓝光***的 CRY1 可能通过蓝光依赖的 CRY1-SWC6/ARP6 相互作用增强 SWC6 与 ARP6 的结合。海南生物技术酵母文库做什么
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