酵母双杂交技术，自创建以来被广泛应用于蛋白互作研究领域，在生命科学的基础探秘研究中起着重要作用。然而该技术设计初衷，*是斯坦利先生为了完成申请学校经费的目的。该技术设计巧妙，它的许多优点在设计之初并未显现，反而在这么多年的高频使用和进一步开发利用过程中越发明显。（引用自MarcVidal&StanleyFields的“Theyeasttwo-hybridassay：stillfindingconnectionsafter25years”）:(1）尽管酵母杂交技术揭示了蛋白质结合位点的详细信息，但操作简单。只需2个质粒+1个菌株即可完成，且有不同体系方便选择。（2）该技术利用比较好的DNA结合位点，有效的***结构域和友好的报告基因系统，可以放大弱互作的信号。（3）该技术可用于各种物种的蛋白互作检测，具有物种普适性，尤其是人类蛋白。（4）衍生技术具有更***的应用，可扩展到检测蛋白质与DNA、蛋白质与RNA、蛋白质与小分子以及其他组合之间的相互作用，甚至可实现将生理相互作用与表型数据直接关联。当然，做过酵母杂交实验的小伙伴应该都了解，互作结果的判断，往往要等酵母生长好几天才能看出来（当然，小欧认为这在伟大的科研事业过程中算不上啥），互作强弱也是主观判断性较强，存在假阳性。酵母单杂交实验步骤酵母文库构建原理。江苏什么是酵母文库做什么
酵母双杂交（Y2H）：植物转录因子（Plant transcripter factors， TFs）是调控植物生长发育和环境适应性的关键分子。虽然在一些数据库中，如RiceSRTFDB （Priya and Jain， 2013）， Ricettissuetfdb （Chen et al.，PlnTFDB （Pérez-Rodríguez et al.， 2009）和PlantTFDB （Jin et al.， 2017），可以预测水稻转录因子功能。但通过具体实验研究，来直接证实转录因子对植物的调控作用仍然是必不可少的。酵母双杂交（Y2H）和酵母单杂交（Y1H）是被用于研究蛋白-蛋白以及蛋白-DNA互作的**常用技术。为了方便和促进水稻育种研究，陈凡老师与欧易生物达成合作，整合双方优势资源，历经春秋与冬夏，成功构建了基于粳稻（日本晴）基因组的水稻转录因子文库。该项成果以“一种高效的筛选系统来鉴定大米转录因子的蛋白质-蛋白质或蛋白质-DNA相互作用伙伴”为题，发表于杂志JGG上。天津生物技术酵母文库专业酵母文库构建和筛选公司多年经验。
酵母双杂交实验表明，PtMADS11 与 PtDAL1 之间存在直接的相互作用（图 C），并通过 BiFC、GST pull-down 得以证实（图 D-E）。为进一步研究在年龄信号调控中的作用机制，分别构建了过表达PtDAL1和PtMADS11的拟南芥。与对照相比，过表达PtDAL1***提前了拟南芥的营养-生殖时相转换（图A），证实PtDAL1在生殖起始和控制花***建立起到了关键作用。过表达PtMADS11植株在短日照下表现出早开花和花序结构过早终止，表明PtMADS11在开花调节和花序内分生组织命运起到调控作用。在拟南芥中利用年龄调控通路不同节点关键基因突变体进行功能互补实验，结果显示过表达PtDAL1可以恢复由于过表达miR156导致的开花延迟，但ft缺失会导致PtDAL1失活，PtDAL1过表达也不能恢复soc1-1-2突变体的表型，表明PtDAL1依赖或处于FT/SOC1的上游。而过表达PtMADS11可以恢复由过表达miR156或ft缺失导致的开花延迟，表明PtMADS11对开花的调控不依赖于miR156或FT。
利用酵母双杂交技术进行筛选，结果显示SP8可以与水稻OsMYC3蛋白相互作用，并且二者互作关系通过酵母一对一互作、BiFC、Co-IP、LCI实验得以验证（图A-C）。利用截短的SP8进行酵母一对一互作和Co-IP检测表明，与OsMYC3的结合依赖于SP8的NTP结构域（图D-E）；同样，OsMYC3的TAD结构域也是二者互作所必不可少的（图F）。酵母双杂交、BiFC实验表明，OsMYC3可以与OsJAZ相互作用。经茉莉酸处理，野生对照株根的长度明显被抑制、一系列JA生物合成和信号传导相关基因表达量上升，但Osmyc3突变体中抑制程度减轻、JA相关基因表达量上升减少。从该技术开发以来，双杂交和三杂交报告基因数量从1个报告基因增加到了4个，降低了假阳性概率。
欧易酵母文库助力小麦根长抑制分子机制研究，近日，中国农业科学院作物科学研究所景蕊莲研究员、河南农业大学王翔副教授为共同通讯作者，在 Journal of Experimental Botany 杂志（IF: 6.992）在线发表了题为“Wheat SHORT ROOT LENGTH 1 gene TaSRL1 regulates root length in an auxin-dependent pathway”的研究论文，报道了小麦 TaSRL1 转录因子调控根长的分子机制。文章中酵母双杂交文库由欧易生物完成。根系是植物从土壤中吸收水分、养分和感知环境刺激的独特***。根系结构的优化有助于提高植株的抗逆性和产量。ERF(ETHYLENERESPONSIVEFACTOR)是植物特有的转录因子家族之一，与植物的多种发育过程和抗逆性有关。ERFs在拟南芥和水稻根系发育中的作用已经多有报道，但小麦ERFs在根系发育中的作用尚待研究。酵母文库"酵母"和"文库"有什么不同。江苏什么是酵母文库做什么
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酵母双杂交文库：疟疾是人类**古老的疾病之一，每年4月25日是世界防治疟疾日，疟疾目前仍是公众健康所面临的**严重威胁之一。基于青蒿素的联合处理法（ACTs）是WHO推荐的比较好处理方案。因发现具有抗疟作用的青蒿素，挽救了数百万人的生命，屠呦呦教授获得了2015年诺贝尔生理或医学奖，从青蒿中分离出的青蒿素被推荐作为抗疟疾的优先药物。之前研究表明，茉莉酸（JA）介导促成的青蒿素积累依赖于光，转录因子HY5也通过参与光信号调控促进青蒿素合成。然而，光与JA相互作用机制及其对青蒿素生物合成调控的潜在机理仍未得到解决。江苏什么是酵母文库做什么
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