酵母双杂交文库:为研究松树生长时相转变和生殖发育的奥秘,本研究收集了油松 7 个年龄段的叶片进行了转录组测序。加权基因共表达网络分析(WGCNA)鉴定到一个与年龄***相关的基因模块(图 A)。按照表达模式,可以分为 2 个子模块:随年龄增长而表达上升的基因子模块、随年龄增长而表达降低的基因子模块(图 B-D)。这些基因在 5-7 年营养生长至生殖生长过渡期发生了一个明显的表达模式转变,表明在生殖发育启动阶段存在一个相对剧烈的时相转变过程。欧易生物酵母文库项目发表 Science 封面文章欧易生物。海南宣传酵母文库报价
通过酵母双杂筛选实验,进一步研究AaWRKY9蛋白功能,结果筛选到了与AaWRKY9互作的AaJAZ9蛋白,并通过Y2H、BiFC、CoIP等进行了验证确认。JAZs是JA介导的植物相应中的负向调控因子,在毛状体和老叶中高表达,在芽尖和嫩叶中表达量低。为确认AaJAZ9是否抑制了AaWRKY9在促进青蒿素积累过程中的转录***功能,通过双荧光素酶报告基因检测实验发现,当AaWRKY9与AaJAZ9共表达时,其转录活性被抑制,而使用MeJA处理后,这种抑制作用被抵消,且AaWRKY9转录活性增强,反向验证实验结果一致。说明JA可以通过降解JAZ9,提高AaWRKY9转录活性,促进青蒿素生物合成。湖北筛库酵母文库酵母三杂交酵母文库数据库。
酵母文库实验由欧易生物完成。6.902)在线发表了题为“MKK4-MPK3-WRKY17-mediated salicylic acid degradation increases susceptibility to Glomerella leaf spot in apple”的研究论文,报道了一个苹果炭疽叶枯病易感相关的转录因子 MdWRKY17,并对其作用机制进行了详细探讨。苹果是世界上颇受欢迎的水果。苹果炭疽叶枯病(Glomerellaleafspot,GLS)在我国多次爆发,是苹果相当有毁灭性的***病害之一,严重影响苹果质量和产量。但目前在苹果中尚未鉴定出GLS的抗性基因。
酵母双杂交、pulldown和BiFC实验均显示,MdTRB1可以通过其C末端与JAZ1蛋白互作。在苹果叶片和愈伤组织中过表达MdJAZ1,花青素和原花青素的累积受到明显抑制。在苹果叶片和愈伤组织***表达MdJAZ1/MdJAZ1,结果显示过表达MdJAZ1抑制了MdTRB1对花青素和原花青素累积的促进作用。Pull down 实验和荧光素酶互补成像实验结果表明,在 MdJAZ1 存在下,MdTRB1 与 MdMYB9 的结合减弱(图 a-c);外源施加 JA 可以部分恢复 MdTRB1 与 MdMYB9 的结合。对于 MdTRB1 在 JA 介导的花青素和原花青素积累中的作用机制,本研究建立了一个新的模型:MdTRB1 通过与 MdMYB9 互作,增强了 MdMYB9 对下游基因的转录***活性,进而正向调节了 JA 介导的花青素和原花青素累积。在 JA 缺乏的条件下,MdJAZ1 与 MdTRB1 互作,干扰了 MdTRB1 与 MdMYB9 之间的结合;在 JA 存在的条件下,MdJAZ1 被降解,MdTRB1 被释放出来以参与后续过程。专业酵母文库构建和筛选公司进口试剂。
文章中酵母双杂交文库由欧易生物协助完成。近日,上海交通大学/复旦-交大-诺丁汉植物生物技术研发中心主任唐克轩课题组在New Phytologist(IF:8.512)发表了题为“AaWRKY9 contributes to light- and jasmonate-mediated to regulate the biosynthesis of artemisinin in Artemisia annua”的研究论文,揭示了青蒿转录因子AaWRKY9有助于光和茉莉酸信号所介导的青蒿素生物合成调控的新型分子机制,本研究通过蓝/红光诱导青蒿中青蒿素生物合成基因的表达,使用转录组分析确定了一个WRKY转录因子AaWRKY9,可明显***青蒿素生物合成相关基因的表达。酵母三杂交系统原理酵母双杂交文库构建。湖北实力酵母文库报价
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酵母双杂交实验表明,PtMADS11 与 PtDAL1 之间存在直接的相互作用(图 C),并通过 BiFC、GST pull-down 得以证实(图 D-E)。为进一步研究在年龄信号调控中的作用机制,分别构建了过表达PtDAL1和PtMADS11的拟南芥。与对照相比,过表达PtDAL1***提前了拟南芥的营养-生殖时相转换(图A),证实PtDAL1在生殖起始和控制花***建立起到了关键作用。过表达PtMADS11植株在短日照下表现出早开花和花序结构过早终止,表明PtMADS11在开花调节和花序内分生组织命运起到调控作用。在拟南芥中利用年龄调控通路不同节点关键基因突变体进行功能互补实验,结果显示过表达PtDAL1可以恢复由于过表达miR156导致的开花延迟,但ft缺失会导致PtDAL1失活,PtDAL1过表达也不能恢复soc1-1-2突变体的表型,表明PtDAL1依赖或处于FT/SOC1的上游。而过表达PtMADS11可以恢复由过表达miR156或ft缺失导致的开花延迟,表明PtMADS11对开花的调控不依赖于miR156或FT。海南宣传酵母文库报价
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