酵母双杂交文库:疟疾是人类**古老的疾病之一,每年4月25日是世界防治疟疾日,疟疾目前仍是公众健康所面临的**严重威胁之一。基于青蒿素的联合处理法(ACTs)是WHO推荐的比较好处理方案。因发现具有抗疟作用的青蒿素,挽救了数百万人的生命,屠呦呦教授获得了2015年诺贝尔生理或医学奖,从青蒿中分离出的青蒿素被推荐作为抗疟疾的优先药物。之前研究表明,茉莉酸(JA)介导促成的青蒿素积累依赖于光,转录因子HY5也通过参与光信号调控促进青蒿素合成。然而,光与JA相互作用机制及其对青蒿素生物合成调控的潜在机理仍未得到解决。不懂就问,酵母文库实验室究竟长啥样?拥有十余年丰富的文库构建。山西建库酵母文库做什么
小欧从2018年即开始关注酵母杂交与高通量测序相结合的技术发展,如2017年CaoGang老师等发表的RLL-Y2H技术,实现了文库筛文库可能,该技术通过对酵母双杂常用载体的改造,并结合高通量测序,可直接获得AD-BD互作蛋白对。所用方法相当巧妙,感兴趣的同学请点击《当酵母双杂交遇到高通量测序》。钮老师团队之前的研究已经鉴定了DAL1作为一种保守的针叶树年龄生物标记基因,在油松从营养生长到生殖生长的时相转变过程中起重要作用。为了进一步理解年龄效应如何驱动针叶树的发育,阐明与DAL1相关的蛋白互作网络很关键。钮老师团队利用传统的Y2H筛选技术结合NGS测序技术,优化得到了Y2H-seq技术,与传统的筛选测序相比,大幅度节省了时间和实验成本。山西建库酵母文库做什么酵母双杂交文库构建实验流程。
酵母文库实验本研究鉴定了一个可以与MdMYB9相互作用的蛋白MdTRB1。实验表明,MdTRB1可以正向调节花青素和原花青素的累积。MdTRB1与MdMYB9结合可以增强后者对下游基因的转录***活性。而MdTRB1与MdJAZ1的结合,可以干扰其与MdMYB9的互作,进而负向调控MdTRB1介导的对花青素和原花青素积累的促进作用。本研究表明,JAZ1-TRB1-MYB9复合物可以动态调控JA介导的花青素和原花青素的积累。本研究为进一步研究JA对花青素和原花青素生物合成的调节提供了新见解。
水稻转录因子文库筛选服务:近几年,中国科学院分子植物科学***创新中心王二涛课题组在植物根瘤共生和菌根共生领域取得三项可以写入教科书级的研究成果。尤其是近两年,已经连续发表了Cell、Nature、MP和PNAS等高水平文章。此外,王二涛研究员也是第二届"科学探索奖"的获得者,肯定他在植物-微生物共生营养交换和菌根共生信号受体发现方面的贡献。2021年10月12日,分子植物***中心王二涛研究团队在Cell上发表题为“磷信号中枢网络调控菌根共生)”的封面论文。***绘制了水稻-丛枝菌根共生的转录调控网络,发现植物直接磷营养吸收途径(根途径)和共生磷营养吸收途径(共生途径)均是受到植物的磷信号网络统一调控,回答了菌根共生领域"自我调节"这一困扰领域的重要科学问题。欧易生物CEO肖云平先生也参与了此项研究。文中水稻转录因子文库筛选服务由欧易生物提供。文章中酵母文库实验由欧易生物完成。
通过传统的酵母双杂交系统,以PtDAL1为诱饵,筛选样本来源于不同年龄段的油松cDNA文库。将获得的阳性克隆,10个一组,挑选到1个96孔板的PCR板孔中,获得10*96个阳性克隆的96孔板。以其中阳性克隆mix为模板,进行PCR扩增,并将所有的PCR产物进行纯化。使用纯化后的PCR产物,进行打断后构建二代测序文库,通过NGS测序,获得6G的阳性克隆数据。通过分析二代测序数据,获得阳性克隆基因信息(去冗余后获得135个互作子,包含21个TFs,2个TRs及酶类、热激蛋白、RNA结合等蛋白,部分见表1)。挑选重要的候选基因进行一对一验证(图2)。与拟南芥中同源基因AGL6的蛋白互作网络进行比对分析。对DAL1互作蛋白(DIPs)的基因表达谱、启动子中的顺势作用元件功能进行分析,并对DIPs进行GO注释(图3)。综合生信分析结果,构建针叶树老化途径的调控模型(图4)。酵母文库是欧易生物***服务项目。福建技术酵母文库报价
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文章中酵母文库实验由欧易生物完成。2021 年 3 月,扬州大学陈忱教授为通讯作者,在 The Plant Journal 杂志(IF: 6.141)在线发表了题为“The rice LEC1-like transcription factor OsNF-YB9 interacts with SPK, an endosperm specific sucrose synthase protein kinase, and functions in seed development”的研究论文,报道了 OsNF-YB9 在调控水稻种子发育中的作用机制。NF-Y转录因子家族成员LEC1在拟南芥胚胎发生和种子发育中发挥了重要作用。水稻中的OsNF-YB9和OsNF-YB7是拟南芥LEC1的同源基因。这些LEC1同源基因在水稻中的作用尚未经报道。山西建库酵母文库做什么
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