通过酵母双杂筛选实验,进一步研究AaWRKY9蛋白功能,结果筛选到了与AaWRKY9互作的AaJAZ9蛋白,并通过Y2H、BiFC、CoIP等进行了验证确认。JAZs是JA介导的植物相应中的负向调控因子,在毛状体和老叶中高表达,在芽尖和嫩叶中表达量低。为确认AaJAZ9是否抑制了AaWRKY9在促进青蒿素积累过程中的转录***功能,通过双荧光素酶报告基因检测实验发现,当AaWRKY9与AaJAZ9共表达时,其转录活性被抑制,而使用MeJA处理后,这种抑制作用被抵消,且AaWRKY9转录活性增强,反向验证实验结果一致。说明JA可以通过降解JAZ9,提高AaWRKY9转录活性,促进青蒿素生物合成。博士期间长期从事酵母单/双杂交文库构建及筛选的工作。北京品质酵母文库报价
文章中酵母双杂交文库由欧易生物协助完成。近日,上海交通大学/复旦-交大-诺丁汉植物生物技术研发中心主任唐克轩课题组在New Phytologist(IF:8.512)发表了题为“AaWRKY9 contributes to light- and jasmonate-mediated to regulate the biosynthesis of artemisinin in Artemisia annua”的研究论文,揭示了青蒿转录因子AaWRKY9有助于光和茉莉酸信号所介导的青蒿素生物合成调控的新型分子机制,本研究通过蓝/红光诱导青蒿中青蒿素生物合成基因的表达,使用转录组分析确定了一个WRKY转录因子AaWRKY9,可明显***青蒿素生物合成相关基因的表达。吉林品质酵母文库欧易生物酵母平台,从公司成立伊始,伴随着公司和客户一路成长,栉风沐雨十多年。
本研究利用水稻转录因子文库筛选,绘制了水稻转录因子和菌根共生相关基因之间的调控网络。该网络受到保守的磷感应途径统一控制,以磷酸盐饥饿响应因子(PHR)为中心。PHRs 是菌根共生所必需的,通过 P1BS 顺式作用元件调控菌根共生相关基因表达。高磷条件下,SPX蛋白抑制 OsPHR2 介导的对菌根共生相关基因表达的调控,进而抑制菌根共生。过表达 OsPHR2 可以部分拮抗磷介导的对菌根共生的抑制作用。本研究发现,植物直接营养吸收和通过菌根共生的间接营养吸收,都受到相同的磷信号网络统一调控。本研究将有助于高效用磷植株的培育。
欧易生物酵母平台,从公司成立伊始,伴随着公司和客户一路成长,栉风沐雨十多年。不仅积累了沉甸甸的项目经验,获得了众多客户认可,协助客户发表Cell、Science 等前列期刊杂志。更值得骄傲的是,我们帮助了国内众多实验室,从无到有建立起了酵母杂交体系,对基础科研贡献了自己的一份力量。**值得欣喜的是,不断有人从我们的酵母产品用户成为了欧易大家庭的一员,流年笑掷,未来可期,我们一起携手继续做更走心的科研服务。欧易生物酵母平台,从公司成立伊始,伴随着公司和客户一路成长,栉风沐雨十多年。不仅积累了沉甸甸的项目经验,获得了众多客户认可,协助客户发表Cell、Science 等前列期刊杂志。更值得骄傲的是,我们帮助了国内众多实验室,从无到有建立起了酵母杂交体系,对基础科研贡献了自己的一份力量。**值得欣喜的是,不断有人从我们的酵母产品用户成为了欧易大家庭的一员,流年笑掷,未来可期,我们一起携手继续做更走心的科研服务。酵母单杂交技术是在酵母双杂基础上发展而来的一种研究核酸。
酵母双杂交实验表明,PtMADS11 与 PtDAL1 之间存在直接的相互作用(图 C),并通过 BiFC、GST pull-down 得以证实(图 D-E)。为进一步研究在年龄信号调控中的作用机制,分别构建了过表达PtDAL1和PtMADS11的拟南芥。与对照相比,过表达PtDAL1***提前了拟南芥的营养-生殖时相转换(图A),证实PtDAL1在生殖起始和控制花***建立起到了关键作用。过表达PtMADS11植株在短日照下表现出早开花和花序结构过早终止,表明PtMADS11在开花调节和花序内分生组织命运起到调控作用。在拟南芥中利用年龄调控通路不同节点关键基因突变体进行功能互补实验,结果显示过表达PtDAL1可以恢复由于过表达miR156导致的开花延迟,但ft缺失会导致PtDAL1失活,PtDAL1过表达也不能恢复soc1-1-2突变体的表型,表明PtDAL1依赖或处于FT/SOC1的上游。而过表达PtMADS11可以恢复由过表达miR156或ft缺失导致的开花延迟,表明PtMADS11对开花的调控不依赖于miR156或FT。文章中酵母文库实验由欧易生物完成。云南实力酵母文库做什么
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蛋白被泛素化后(即蛋白上结合了泛素),意味着将要被运往蛋白酶体降解,一般用于降解细胞内老弱病残蛋白,再回收利用。同时也被用于排除异己,抵御外敌。该过程需要一系列酶介导:泛素***酶(E1)、泛素偶联酶(E2)和泛素E3连接酶(E3)。其中E3是起特异性识别作用的,即决定谁该被降解,不能把好同志降解掉。所以E3基因很多,植物中主要有四种类型:HECT、RING、U-box和CRLs。其中CRLs是植物中含量**丰富的E3连接酶。本研究中,通过酵母双杂交筛选到的标题蛋白MdBT2,整好是CRLs亚家族之一。因此作者推测MdBT2可能在与ApNMV1a结合后,起到了促进其泛素化和降解的作用。北京品质酵母文库报价
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