酵母双杂交、pulldown和BiFC实验均显示，MdTRB1可以通过其C末端与JAZ1蛋白互作。在苹果叶片和愈伤组织中过表达MdJAZ1，花青素和原花青素的累积受到明显抑制。在苹果叶片和愈伤组织***表达MdJAZ1/MdJAZ1，结果显示过表达MdJAZ1抑制了MdTRB1对花青素和原花青素累积的促进作用。Pull down 实验和荧光素酶互补成像实验结果表明，在 MdJAZ1 存在下，MdTRB1 与 MdMYB9 的结合减弱（图 a-c）；外源施加 JA 可以部分恢复 MdTRB1 与 MdMYB9 的结合。对于 MdTRB1 在 JA 介导的花青素和原花青素积累中的作用机制，本研究建立了一个新的模型：MdTRB1 通过与 MdMYB9 互作，增强了 MdMYB9 对下游基因的转录***活性，进而正向调节了 JA 介导的花青素和原花青素累积。在 JA 缺乏的条件下，MdJAZ1 与 MdTRB1 互作，干扰了 MdTRB1 与 MdMYB9 之间的结合；在 JA 存在的条件下，MdJAZ1 被降解，MdTRB1 被释放出来以参与后续过程。初筛+复筛提高目标阳性克隆质粒精确度。一对一筛库验证服务，客户无需再次验证。技术酵母文库质量
文章中酵母文库实验由欧易生物完成。2021 年 3 月，扬州大学陈忱教授为通讯作者，在 The Plant Journal 杂志（IF: 6.141）在线发表了题为“The rice LEC1-like transcription factor OsNF-YB9 interacts with SPK, an endosperm specific sucrose synthase protein kinase, and functions in seed development”的研究论文，报道了 OsNF-YB9 在调控水稻种子发育中的作用机制。NF-Y转录因子家族成员LEC1在拟南芥胚胎发生和种子发育中发挥了重要作用。水稻中的OsNF-YB9和OsNF-YB7是拟南芥LEC1的同源基因。这些LEC1同源基因在水稻中的作用尚未经报道。技术酵母文库质量欧易生物提供的酵母杂交技术服务已经协助科研用户发表了Science、Cell、PNAS等多家前列期刊杂志。
通过传统的酵母双杂交系统，以PtDAL1为诱饵，筛选样本来源于不同年龄段的油松cDNA文库。将获得的阳性克隆，10个一组，挑选到1个96孔板的PCR板孔中，获得10*96个阳性克隆的96孔板。以其中阳性克隆mix为模板，进行PCR扩增，并将所有的PCR产物进行纯化。使用纯化后的PCR产物，进行打断后构建二代测序文库，通过NGS测序，获得6G的阳性克隆数据。通过分析二代测序数据，获得阳性克隆基因信息（去冗余后获得135个互作子，包含21个TFs，2个TRs及酶类、热激蛋白、RNA结合等蛋白，部分见表1）。挑选重要的候选基因进行一对一验证（图2）。与拟南芥中同源基因AGL6的蛋白互作网络进行比对分析。对DAL1互作蛋白（DIPs）的基因表达谱、启动子中的顺势作用元件功能进行分析，并对DIPs进行GO注释（图3）。综合生信分析结果，构建针叶树老化途径的调控模型（图4）。
进行了酵母双杂交文库的筛选，结果显示钙依赖的种子特异性蛋白激酶SPK可以与OsNF-YB9相互作用，分段截取互作验证显示OsNF-YB9的N端是互作所必须的（图a-b），并通过双荧光分子互补实验、BiFC、体外GST-pulldown实验得以证实（图c-e）。亚细胞定位显示SPK主要在细胞质中表达，OsNF-YB9在细胞质和细胞核中都有表达，共表达SPK和OsNF-YB9***促进了OsNF-YB9的入核（图f），表明SPK和OsNF-YB9的相互作用可能促进了OsNF-YB9从细胞质向细胞核的运输。RT-PCR显示SPK在发育中的种子中高表达，在5DAF开始***，并在10-30DAF维持高表达水平（图a-b）。spk敲除突变体种子中垩白率的增加（图c-e），但粒形和粒重与野生型没有***差别。液态酵母单双杂高通量筛库方法及其应用。
酵母文库：2021年11月，山东农业大学园艺科学与工程学院张振鲁团队在MolecularPlantPathology（IF：5.663）发表了题为“Nitrate-inducibleMdBT2actsasarestrictionfactortolimitapplenecroticmosaicvirusgenomereplicationinMalusdomestica”的研究论文，报道了MdBT2蛋白在抑制病毒ApNMV基因组RNA复制中的作用。文章中所用酵母文库为欧易生物构建。ApNMV与ApMV相似，含有3种正义单链基因组RNAs：RNA1（编码1a蛋白，后面你会经常看到它，对病毒复制至关重要），RNA2（编码RNA聚合酶）和RNA3（编码MP），以及在3种RNA中排名第4的RNA4（编码CP）。当然苹果如何抵抗ApNMV的研究机制就更少了。为在校期间为实验室构建3个高效的水稻酵母双杂交文库。技术酵母文库质量
欧易生物21天极速建库，一个文库可以同时做单杂、双杂、三杂，化药小分子筛选。技术酵母文库质量
酵母文库实验本研究鉴定了一个可以与MdMYB9相互作用的蛋白MdTRB1。实验表明，MdTRB1可以正向调节花青素和原花青素的累积。MdTRB1与MdMYB9结合可以增强后者对下游基因的转录***活性。而MdTRB1与MdJAZ1的结合，可以干扰其与MdMYB9的互作，进而负向调控MdTRB1介导的对花青素和原花青素积累的促进作用。本研究表明，JAZ1-TRB1-MYB9复合物可以动态调控JA介导的花青素和原花青素的积累。本研究为进一步研究JA对花青素和原花青素生物合成的调节提供了新见解。技术酵母文库质量
上海欧易生物医学科技有限公司是以提供科研服务，科研检测，学术研究，技术咨询内的多项综合服务，为消费者多方位提供科研服务，科研检测，学术研究，技术咨询，公司始建于2009-03-10，在全国各个地区建立了良好的商贸渠道和技术协作关系。公司主要提供检验检测服务。（依法须经批准的项目，经相关部门批准后方可开展经营活动，具体经营项目以相关部门批准文件或许可证件为准）一般项目：生物医药产品、生化产品的研发，医药中间体、化工原料及产品（除危险品化学品、监控化学品、易制毒化学品）的研发、销售，仪器仪表的销售，并提供相关技术咨询、技术服务，会务服务，企业管理咨询。等领域内的业务，产品满意，服务可高，能够满足多方位人群或公司的需要。多年来，已经为我国医药健康行业生产、经济等的发展做出了重要贡献。
