单杂交筛选为了挖掘影响ALA诱导苹果黄酮醇积累的关键性调控因子,作者以Y1HGold[proMdFLS1-AbAi] 为诱饵,通过酵母单杂交筛选了ALA处理后的苹果愈伤组织cDNA文库。结果显示筛选出的蛋白质主要参与光合作用调控、碳糖代谢、氧化/渗透胁迫响应、***信号转导、木质素生物合成、果实成熟发育等过程,以及一些功能未知的蛋白质。其中, MdSCL8转录因子,由于其在草莓中的同源基因已被报导与黄酮的合成有关,引起了研究者的注意。进一步通过Y1H assay验证确认了MdSCL8可以与MdFLS1启动子互作(图2A)。通过双荧光素酶实验和GUS检测,发现MdSCL8可以负向调控MdFLS1启动子活性(图2B-D)。进口试剂高服务质量市场份额大酵母文库。江西应用酵母文库做什么
酵母单杂交筛选技术:关于HIV想必大家都不陌生,***HIV病毒后潜伏周期长,且目前没有完全的***方法。为了彻底***HIV,不让其发病就要从2方面入手:要么消除潜伏***的细胞,要么防止潜伏原病毒的细胞被***。也就是需要抑制HIV病毒的转录。但是关于HIV在人细胞中的复制、转录和潜伏期调控的分子网络仍不完全确定,所以目前HIV仍不能被**。为了帮助解决这个问题,波士顿大学的研究者,使用酵母单杂交筛选技术,以HIV-1,HIV-2的LTR(启动子和增强子)为诱饵,筛选了人的转录因子文库(包含1086个人的转录因子),**终绘制了调节HIV-1和HIV-2的转录网络图谱,结果发表在2021年的PNAS杂志上。海南什么是酵母文库报价10年酵母双杂交建库筛库经验结合SMART和GATEWAY建库技术优势。
文库筛选做的好,培养基和转化试剂少不了。实验做不出、克隆生长不正常的小伙伴,你是不是会怀疑培养基配的有问题,或者转化试剂配的不对?欧易生物现隆重推出酵母双杂、单杂筛选、一对一互作验证的配套培养基、转化试剂啦~该系列产品,经欧易生物实验室多年使用、不断改良,质量保证,物美价廉。所有培养基均无需调pH,使用方便。*需将1袋**包装的培养基溶于500mlddH2O中,然后121℃高压灭菌15min,固体培养基冷却至50℃左右即可倒板使用,液体培养基冷却至室温后直接使用。从现在开始再也不用为重复配制试剂、重复做实验、不停的花费时间验证而头秃了。
酵母单杂交筛选:(4)在筛选到的转录因子中,***GL1促进HIV-2转录。***GL1在免疫细胞中***表达,并与HIV的其他转录***因子,即Sp1、AP-1和PCAF/CBP/P300存在相互作用,本研究中显示HEK293T细胞中,***GL1过表达后,与LTR连接的萤火素酶表达上升近2倍,说明***GL1是一个转录***因子。值得一提的是,文章的背景介绍内容中,对应用其他技术(如RNAi、scRNA-seq、CRISPR等)对HIV转录调控方向的已有成果分析,发现这些方法为HIV-1的复制和潜伏期提供了见解,但并没有直接评估转录因子的结合和功能。文章中也对酵母单杂交技术与其他互作组技术(如Chip-seq、motif预测)进行了比较分析,发现eY1H技术对已识别因子的验证率为30-60%,同等或优于其他技术。一个专属自己的酵母文库才是正确的打开方式。
通过酵母双杂交进行筛选,结果显示 SWC6 可以在蓝光下与 CRY1 相互作用(图 A-C)。同样,酵母双杂交实验显示 CRY2 也可以在蓝光下与 SWC6 相互作用(图 D)。并通过 pull-down、split-LUC、semi-in vivo pull-down、Co-IP 实验(图 E-L)证实 CRY1、CRY2 与 SWC6 的结合是蓝光依赖性的。SWC6 是真核生物中已报道的 SWR1 复合物亚基,负责催化 H2A.Z 在染色质上的替换。已报道 SWR1 复合物中 SWC6 可以与 ARP6 亚基结合。Pull-down、split-LUC、semi-in vivo pull-down、Co-IP 实验(图 A-H)显示,CRY1、CRY2 可以蓝光依赖性与 ARP6 结合。使用原装酵母技术试剂盒、培养基,保证实验质量。实验流程细致谨慎,实验团队经验丰富。山西酵母文库是什么
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酵母文库实验:本研究发现了一个硝酸盐响应的 BTB/TAZ 蛋白 MdBT2,它参与调节硝酸盐介导的苹果植株生长。利用酵母双杂交、蛋白质 pull-down、BiFC 实验证实,MdBT2 可以与一个 DELLA 蛋白 MdRGL3a 互作,这种互作是 MdRGL3a 蛋白经由 26S 蛋白酶体途径的泛素化及降解所必需的。此外,异源表达 MdBT2 部分回复了 MdRGL3a 过表达所导致的拟南芥生长抑制。综上表明,MdBT2 可以通过降低 DELLA 蛋白 MdRGL3a 的丰度促进硝酸盐介导的植物生长。实验室培养显示,培养 45 天,苹果幼苗的高度和生物量随硝酸盐浓度的增加而增加(图 A-C)。江西应用酵母文库做什么
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