酵母双杂交文库:疟疾是人类**古老的疾病之一,每年4月25日是世界防治疟疾日,疟疾目前仍是公众健康所面临的**严重威胁之一。基于青蒿素的联合处理法(ACTs)是WHO推荐的比较好处理方案。因发现具有抗疟作用的青蒿素,挽救了数百万人的生命,屠呦呦教授获得了2015年诺贝尔生理或医学奖,从青蒿中分离出的青蒿素被推荐作为抗疟疾的优先药物。之前研究表明,茉莉酸(JA)介导促成的青蒿素积累依赖于光,转录因子HY5也通过参与光信号调控促进青蒿素合成。然而,光与JA相互作用机制及其对青蒿素生物合成调控的潜在机理仍未得到解决。酵母文库酵母双杂交筛库个性化定制研究方案。四川技术酵母文库做什么
本研究通过酵母双杂交筛选,鉴定到 CRY1 可以与 SWR1 复合物关键亚基 SWC6、ARP6 结合,共同以蓝光依赖模式调控 H2A.Z 在染色质的沉积。蓝光***的 CRY1 可以增强 SWC6 与 ARP6 的相互作用。此外,HY5 也可以与 SWC6、ARP6 结合,将 SWR1 复合物募集到 HY5 靶向位置,调控 HY5 靶基因的表达,进而影响拟南芥下胚轴的伸长据此,本研究提出拟南芥光形态建成调控的分子机制:CRY1 通过增强 SWR1 复合物活性和 HY5 介导 SWR1 复合物向 HY5 靶基因的募集,共同促进 H2A.Z 染色质沉积,以调控 HY5 靶基因的表达和蓝光条件下光形态建成。重庆生物技术酵母文库做什么文库筛选经验 与上千所高校及科研院所合作 完成年均400多个物种的文库构建及筛选 。
进行了酵母双杂交文库的筛选,结果显示钙依赖的种子特异性蛋白激酶SPK可以与OsNF-YB9相互作用,分段截取互作验证显示OsNF-YB9的N端是互作所必须的(图a-b),并通过双荧光分子互补实验、BiFC、体外GST-pulldown实验得以证实(图c-e)。亚细胞定位显示SPK主要在细胞质中表达,OsNF-YB9在细胞质和细胞核中都有表达,共表达SPK和OsNF-YB9***促进了OsNF-YB9的入核(图f),表明SPK和OsNF-YB9的相互作用可能促进了OsNF-YB9从细胞质向细胞核的运输。RT-PCR显示SPK在发育中的种子中高表达,在5DAF开始***,并在10-30DAF维持高表达水平(图a-b)。spk敲除突变体种子中垩白率的增加(图c-e),但粒形和粒重与野生型没有***差别。
酵母文库实验本研究鉴定了一个可以与MdMYB9相互作用的蛋白MdTRB1。实验表明,MdTRB1可以正向调节花青素和原花青素的累积。MdTRB1与MdMYB9结合可以增强后者对下游基因的转录***活性。而MdTRB1与MdJAZ1的结合,可以干扰其与MdMYB9的互作,进而负向调控MdTRB1介导的对花青素和原花青素积累的促进作用。本研究表明,JAZ1-TRB1-MYB9复合物可以动态调控JA介导的花青素和原花青素的积累。本研究为进一步研究JA对花青素和原花青素生物合成的调节提供了新见解。10年酵母双杂交建库筛库经验结合SMART和GATEWAY建库技术优势。
酵母双杂交实验表明,PtMADS11 与 PtDAL1 之间存在直接的相互作用(图 C),并通过 BiFC、GST pull-down 得以证实(图 D-E)。为进一步研究在年龄信号调控中的作用机制,分别构建了过表达PtDAL1和PtMADS11的拟南芥。与对照相比,过表达PtDAL1***提前了拟南芥的营养-生殖时相转换(图A),证实PtDAL1在生殖起始和控制花***建立起到了关键作用。过表达PtMADS11植株在短日照下表现出早开花和花序结构过早终止,表明PtMADS11在开花调节和花序内分生组织命运起到调控作用。在拟南芥中利用年龄调控通路不同节点关键基因突变体进行功能互补实验,结果显示过表达PtDAL1可以恢复由于过表达miR156导致的开花延迟,但ft缺失会导致PtDAL1失活,PtDAL1过表达也不能恢复soc1-1-2突变体的表型,表明PtDAL1依赖或处于FT/SOC1的上游。而过表达PtMADS11可以恢复由过表达miR156或ft缺失导致的开花延迟,表明PtMADS11对开花的调控不依赖于miR156或FT。酵母文库产品线由7个实验室组成,分别有RNA抽提室,RNA质检室、酵母建库室、筛库室等。吉林生物技术酵母文库做什么
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根系是植物从土壤中吸收水分、养分和感知环境刺激的独特***。根系结构的优化有助于提高植株的抗逆性和产量。ERF(ETHYLENERESPONSIVEFACTOR)是植物特有的转录因子家族之一,与植物的多种发育过程和抗逆性有关。ERFs在拟南芥和水稻根系发育中的作用已经多有报道,但小麦ERFs在根系发育中的作用尚待研究。报道了小麦 TaSRL1 转录因子调控根长的分子机制。文章中酵母双杂交文库由欧易生物完成。从小麦基因组中克隆了 TaSRL1 基因,RT-PCR 显示 TaSRL1 主要在小麦苗期的根中表达。对 TaSRL1 启动子序列进行预测分析。四川技术酵母文库做什么
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