本研究通过酵母双杂交筛选,鉴定到 CRY1 可以与 SWR1 复合物关键亚基 SWC6、ARP6 结合,共同以蓝光依赖模式调控 H2A.Z 在染色质的沉积。蓝光***的 CRY1 可以增强 SWC6 与 ARP6 的相互作用。此外,HY5 也可以与 SWC6、ARP6 结合,将 SWR1 复合物募集到 HY5 靶向位置,调控 HY5 靶基因的表达,进而影响拟南芥下胚轴的伸长据此,本研究提出拟南芥光形态建成调控的分子机制:CRY1 通过增强 SWR1 复合物活性和 HY5 介导 SWR1 复合物向 HY5 靶基因的募集,共同促进 H2A.Z 染色质沉积,以调控 HY5 靶基因的表达和蓝光条件下光形态建成。酵母杂交案例专业的硕博团队。广东运用酵母文库做什么
小欧从2018年即开始关注酵母杂交与高通量测序相结合的技术发展,如2017年CaoGang老师等发表的RLL-Y2H技术,实现了文库筛文库可能,该技术通过对酵母双杂常用载体的改造,并结合高通量测序,可直接获得AD-BD互作蛋白对。所用方法相当巧妙,感兴趣的同学请点击《当酵母双杂交遇到高通量测序》。钮老师团队之前的研究已经鉴定了DAL1作为一种保守的针叶树年龄生物标记基因,在油松从营养生长到生殖生长的时相转变过程中起重要作用。为了进一步理解年龄效应如何驱动针叶树的发育,阐明与DAL1相关的蛋白互作网络很关键。钮老师团队利用传统的Y2H筛选技术结合NGS测序技术,优化得到了Y2H-seq技术,与传统的筛选测序相比,大幅度节省了时间和实验成本。四川酵母文库是什么欧易生物酵母文库拥有GAL4系统、泛素系统,单杂、双杂等多种酵母杂交筛选方法。
酵母文库实验:本研究发现了一个硝酸盐响应的 BTB/TAZ 蛋白 MdBT2,它参与调节硝酸盐介导的苹果植株生长。利用酵母双杂交、蛋白质 pull-down、BiFC 实验证实,MdBT2 可以与一个 DELLA 蛋白 MdRGL3a 互作,这种互作是 MdRGL3a 蛋白经由 26S 蛋白酶体途径的泛素化及降解所必需的。此外,异源表达 MdBT2 部分回复了 MdRGL3a 过表达所导致的拟南芥生长抑制。综上表明,MdBT2 可以通过降低 DELLA 蛋白 MdRGL3a 的丰度促进硝酸盐介导的植物生长。实验室培养显示,培养 45 天,苹果幼苗的高度和生物量随硝酸盐浓度的增加而增加(图 A-C)。
欧易酵母文库助力苹果花青素合成调控机制研究。近日,山东农业大学郝玉金、由春香教授为共同通讯作者,在ThePlantJournal(IF:6.141)期刊发表了题为“JasmonateinducesanthocyaninandproanthocyanidinbiosynthesisinapplebymediatingtheJAZ1-TRB1-MYB9complex”的研究论文,报道了茉莉酸通过介导JAZ1-TRB1-MYB9复合物诱导苹果中花青素和原花青素的生物合成。山东农业大学安建平博士为***作者,文章中酵母文库实验由欧易生物协助完成。欧易生物一直助力于各酵母文库实验室更好的使用该项技术,探索生命科学奥秘。
利用酵母文库进行双杂交筛选,结果显示 MdBT2 可以与 MdRGL3a 结合。MdRGL3a 编码 GA 信号阻遏物 DELLA 蛋白,主要分布于细胞核中。MdRGL3a 对于 GA 处理非常敏感,可以引起其发生降解,PAC 处理可以提高其稳定性。进一步的酵母一对一杂交验证实验表明,两者的结合依赖于 MdBT2 的 BTB 和 BACK 结构域、MdRGL3a 的 LHRI 和 SAW motif(图 A-B)。并通过 GST pull-down、BiFC 实验也证实了 MdBT2与 MdRGL3a 的结合(图 C-D)。细胞外降解实验显示,与对照相比,MdRGL3a 与过表达 MdBT2 的愈伤组织的总蛋白共同孵育,会导致 MdRGL3a 的降解加快;而与抑制 MdBT2 表达的愈伤组织的总蛋白共同孵育,会导致 MdRGL3a 的降解减缓(图 A)。并且蛋白酶体抑制剂 MG132 可以***抑制 MdRGL3a 的降解(图 B)。改变 MdRGL3a 表达量并不影响 MdBT2 的降解。以上结果表明,MdRGL3a 可能通过 26S 蛋白酶体途径发生降解,而 MdBT2 可以抑制 MdRGL3a 的降解。10年酵母双杂交建库筛库经验结合SMART和GATEWAY建库技术优势。四川酵母文库是什么
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文章中酵母双杂交文库由欧易生物制备。2021年5月,北京林业大学钮世辉副教授为通讯作者,在PlantPhysiology杂志(IF:6.902)在线发表了题为“MADS-boxtranscriptionfactorsMADS11andDAL1interacttomediatethevegetative-to-reproductivetransitioninpine”的研究论文,深入探讨了油松中营养生长-生殖生长时相转变调控的分子机制。北京林业大学马晶晶博士为***作者,文章中酵母双杂交文库由欧易生物制备。本研究通过 7 个树龄的油松样品转录组测序,鉴定到一个与年龄信号***相关的基因模块,该模块包含 33 个转录因子,包括 SOC1-like、DAL1 等。广东运用酵母文库做什么
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