酵母双杂交筛选实验:为进一步了解LEA3蛋白在干旱胁迫下调控植物生长和增强抗旱性的分子机制,本研究以干旱胁迫条件下的棉花根茎叶为材料,构建了棉花干旱胁迫酵母文库。并以GhLEA3为诱饵,采用酵母双杂交筛选实验,从棉花酵母文库中筛选获得了GhLEA3互作蛋白,并对互作蛋白进行了GO和KEGG分析,发现其中的互作蛋白GhVDAC1主要参与钙信号通路和cGMP-PKG信号通路,互作蛋白Gh***A参与多种生物途径,如糖原生成和代谢途径。此外,GhVDAC1和Gh***A受干旱胁迫诱导表达***,且在GhLEA3敲除的棉株中表达量低于野生型棉株酵母单杂交实验步骤酵母文库构建原理。山东生物技术酵母文库
目前,欧易生物负责该水稻转录因子文库的维护和保存工作,并对广大水稻科研工作者提供转录因子筛选服务。如去年欧易生物助力中国科学院分子植物科学***创新中心的王二涛老师应用该文库对水稻-丛枝菌根进行了深入研究,成功构建了水稻-丛枝菌转录调控网络,结果发表于《Cell》封面。截至文章发表,该文库已收录了1683个水稻转录因子,隶属于54个家族,覆盖预测的水稻转录因子总量的70%。文库中水稻转录因子的a基因信息来源于PlantTFDB和KOME数据库。文库载体使用pGADT7,酵母菌株使用Y187,每一个转录因子菌株**保存于96孔板中。河北酵母文库应用合作文章上百篇,平均影响因子高达7.124 欧易生物酵母文库。
欧易生物酵母文库技术发表的又一篇高水平研究论文。植物***茉莉酸(JA)参与植物许多发育过程的调控。JAZ蛋白是茉莉酸信号反应的阻遏物,通过抑制JA转录调节剂来负向调节JA信号。花青素和原花青素是种子、叶、花和果实中重要的植物次生代谢产物,可充当抗氧化剂,帮助***活性氧和对**老,对人类健康具有重要价值。已有研究表明,花青素和原花青素的生物合成基因的转录受MYB、basichelix-loop-helix(bHLH)及WD40蛋白的调控。其中,苹果MYB转录因子MdMYB9参与调控JA介导的花青素和原花青素的生物合成,但其分子机制仍有待深入研究。
酵母双杂交实验表明,PtMADS11 与 PtDAL1 之间存在直接的相互作用(图 C),并通过 BiFC、GST pull-down 得以证实(图 D-E)。为进一步研究在年龄信号调控中的作用机制,分别构建了过表达PtDAL1和PtMADS11的拟南芥。与对照相比,过表达PtDAL1***提前了拟南芥的营养-生殖时相转换(图A),证实PtDAL1在生殖起始和控制花***建立起到了关键作用。过表达PtMADS11植株在短日照下表现出早开花和花序结构过早终止,表明PtMADS11在开花调节和花序内分生组织命运起到调控作用。在拟南芥中利用年龄调控通路不同节点关键基因突变体进行功能互补实验,结果显示过表达PtDAL1可以恢复由于过表达miR156导致的开花延迟,但ft缺失会导致PtDAL1失活,PtDAL1过表达也不能恢复soc1-1-2突变体的表型,表明PtDAL1依赖或处于FT/SOC1的上游。而过表达PtMADS11可以恢复由过表达miR156或ft缺失导致的开花延迟,表明PtMADS11对开花的调控不依赖于miR156或FT。酵母文库能够完美解决上述的问题,且一个文库可以并不是只有一个人可以用。
欧易酵母文库助力小麦根长抑制分子机制研究,近日,中国农业科学院作物科学研究所景蕊莲研究员、河南农业大学王翔副教授为共同通讯作者,在 Journal of Experimental Botany 杂志(IF: 6.992)在线发表了题为“Wheat SHORT ROOT LENGTH 1 gene TaSRL1 regulates root length in an auxin-dependent pathway”的研究论文,报道了小麦 TaSRL1 转录因子调控根长的分子机制。文章中酵母双杂交文库由欧易生物完成。根系是植物从土壤中吸收水分、养分和感知环境刺激的独特***。根系结构的优化有助于提高植株的抗逆性和产量。ERF(ETHYLENERESPONSIVEFACTOR)是植物特有的转录因子家族之一,与植物的多种发育过程和抗逆性有关。ERFs在拟南芥和水稻根系发育中的作用已经多有报道,但小麦ERFs在根系发育中的作用尚待研究。为在校期间为实验室构建3个高效的水稻酵母双杂交文库。福建什么是酵母文库
欧易生物酵母文库拥有GAL4系统、泛素系统,单杂、双杂等多种酵母杂交筛选方法。山东生物技术酵母文库
母文库实验由欧易生物完成。2021年3月16日,宁波大学陈剑平院士、孙宗涛研究员为共同通讯作者,在PNAS杂志(IF:9.412)在线发表了题为“AclassofindependentlyevolvedtranscriptionalrepressorsinplantRNAvirusesfacilitatesviralinfectionandvectorfeeding”的研究论文,深入报道了在不同植物RNA病毒中一种***存在的、通过劫持茉莉酸信号途径以协同促进病毒传播和介体昆虫摄食的新机制。植物病毒基因组通常*编码少数几个蛋白,它们必需依赖寄主植物才能完成自身的侵染和增殖。因此植物病毒往往通过其编码的蛋白来劫持或者利用寄主因子来实现自身的复制,并在植物体内传播,产生系统性***。山东生物技术酵母文库
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