湖南分子荧光寿命成像哪里有

荧光寿命显微成像技术具有对生物大分子结构、动力学信息和分子环境等进行高分辨高精度测量的能力，因此其重要性日渐提升，被普遍地应用于生物学研究及临床诊断等领域。荧光寿命，分子包含多个能态S0、S1、S2和三重态T1，每个能态都包含多个精细的能级。正常情况下，大部分电子处在较低能态即基态S0的较低能级上，当分子被光束照射，会吸收光子能量，电子被激发到更高的能态S1或S2上，在S2能态上的电子只能存在很短暂的时间，便会通过内转换过程跃迁到S1上，而S1能态上的电子亦会在极短时间内跃迁到S1的较低能级上，而这些电子会存在一段时间后通过震荡弛豫辐射跃迁到基态，这个过程会释放一个光子，即荧光。荧光寿命成像和生物发光的不同之处是什么？湖南分子荧光寿命成像哪里有

荧光寿命的测量和荧光寿命成像主要有时间相关单光子计数法（time correlated single photon counting, TCSPC）、门控探测法（time-gated detection）、条纹相机测量法（streak-FLIM）、频闪技术等四种常见的方法。TCSPC是目前测量荧光寿命的主要技术，同轴脉冲光源发出的脉冲光引起起始光电倍增管产生电信号，该信号通过恒分信号甄别器1启动时幅转换器（time-amplitude converter，TAC），时幅转换器产生一个随时间线性增长的电压信号。此外，同轴脉冲光源发出的脉冲光通过激发单色器后到达样品池，样品产生的荧光信号再经过发射单色器到达终止光电倍增管，由此产生的电信号经由恒分信号甄别器2到达时幅转换器并使其停止工作。上海生物荧光寿命成像怎么样荧光寿命显微成像具有高特异性、高灵敏度、可定量测量微环境变化。

影响荧光寿命成像测量的因素：高浓度样品的影响：1）当激发光照射高浓度样品时，在激发光入口附近产生荧光，但这些荧光并不能进入荧光检测器。2）高浓度的分子之间相互作用而发生活性阻碍现象。3）荧光的再吸收：即荧光光谱的短波长端和激发光谱的长波长端如果相互重叠，则发生荧光再吸收。荧光寿命成像具有200 nm的空间分辨率和皮秒量级的时间分辨率。散射光的影响： 主要是瑞利散射光和拉曼散射光的影响较大。校正办法：先用短的激发光激发，检出溶液的拉曼峰，然后进行荧光光谱校正。因为荧光光谱不随激发光波长的改变而改变，而拉曼光却随之改变。

荧光寿命成像中的荧光寿命是什么意思？有什么用？假定两种衰减跃迁速率分别为Γ和knr，则激发态衰减速率可表示为：其中n(t)表示时间t时激发态分子的数目，由此可得到激发态物种的单指数衰减方程。荧光寿命定义为衰减总速率的倒数：荧光强度正比于衰减的激发态分子数，因此可将上式改写为：其中I0是时间为零时的荧光强度，τ为荧光寿命。也就是说荧光强度衰减到初始强度的1/e时所需要的时间就是该荧光物种在测定条件下的荧光寿命。事实上当荧光物质被激发后有些激发态分子立即返回基态，有的甚至可以延迟到5倍于荧光寿命时才返回基态，这样就形成了实验测定的荧光强度衰减曲线。由于荧光寿命成像不受样品浓度影响具有其他荧光成像技术无法代替的优异性能。荧光寿命成像一般不受诸如激光或荧光强度扰动、染料的光漂白以及其他有碍荧光强度的因素的影响。

荧光寿命成像可以在体现荧光物质形貌信息之外，还能够灵敏地反应荧光基团生化特性以及周围微环境的变化情况。将荧光寿命成像与共聚焦成像技术结合起来，实现人体三维荧光寿命成像，进一步实现人体三维功能成像奠定基础，有潜力应用于瘤识别，病变诊断等领域。荧光寿命是荧光基团在通过发射荧光光子返回基态之前在其激发态下保持平均多长时间的量度。不同荧光基团激发态停时间不同，大多数生物荧光素的荧光寿命时间在 0.2 - 20 ns。荧光寿命检测经典方法为点对点的时间相关单光子计数（TCSPC），但由于过去检测硬件的局限和复杂的使用而没有被普遍地应用于科学研究。随着技术的发展，在显微镜视野内进行超快速全像素荧光寿命信号采集的荧光寿命成像成为可能。荧光寿命成像可以直接检测荧光和时间分辨的荧光寿命。荧光寿命成像

荧光寿命成像(FLIM)可用于测量分子环境参数，通过荧光共振能量转移进行的蛋白质相互作用。湖南分子荧光寿命成像哪里有

荧光寿命成像技术用于表征DNA压缩和基因活性。研究团队发展了荧光寿命成像技术（FLIM），表征DNA压缩的动态过程，克服了以往方法的局限性。研究团队提出了两种精确测量DNA压缩程度的FLIM分析方法。第一种方法基于加入DNA的荧光探针的荧光寿命与其局部微环境折射率之间的逆二次方关系，荧光探针的寿命随DNA压缩密度而变化，从而可表征DNA压缩程度。第二种方法是将荧光标记的核苷酸整合到DNA链中，通过一种叫做荧光共振能量转移（FRET）的技术获得其荧光寿命值的变化，从而反映出DNA的压缩程度的动态变化过程。细胞培养结果证明，两种FLIM分析方法都可以成功表征DNA压缩的动态过程。湖南分子荧光寿命成像哪里有

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