金像显微镜调试

使用显微镜时，您可能会遇到显微镜的专业术语，这些用语都代表什么意思呢？

综合放大倍率：综合放大倍率=目镜倍率 x 物镜倍率。

视场数（F.N）：视场数指目镜能否在广视野下进行观察的指标。样品表面的观察范围取决于目镜的视场光阑直径，该直径的值（以mm为单位）被称为视场数。F.N=Field Number。

实视场（FOV）：指通过目镜观察时实际观察和观察工件的实际范围。FOV：Field Of View

PC显示倍率（TV综合倍率）：PC显示器倍率（TV综合倍率）是指相机摄像元件对角线长度与PC显示器屏幕对角线长度之比。当显微镜通过CCD 设备连接至电脑上进行成像观察时，就需要评价显示器倍率了。

工作距离（WD）：工作距离是指聚焦时物镜镜头头部顶点到检查物体表面的距离，在该距离下可实现清晰的对焦。工作距离越长,聚焦时操作性越好,不用担心镜头会碰上检查物体。WD：WorkingDistance

齐焦距离（PFD）：齐焦距离是指聚焦时从物镜安装位置到合焦时检查物体表面的距离。PFD：ParFieldDistance

焦点距离（FD）：焦点距离指镜头（主点）到焦点的距离。FD：Focus Distance

焦点深度（DOF）：焦点深度是指聚焦之后,聚焦位置前后移动,也能清晰的观察的前后移动范围。DOF：Depth Of Focus 探针台用显微镜如何挑选；金像显微镜调试

激光共焦扫描显微镜是点成像，因此要想获得物体的二维图像，需要借助于x和y方向的二维扫描。不同的显微镜采用不同的扫描方式：

(1)物体扫描。即物体本身按照一定的规律移动，而光束保持不变。

优点：光路稳定；缺点：需要大幅度的扫描工作台，因此扫描速度受到很大限制。

(2)利用反射式振镜构成光束扫描系统。即通过控制扫描振镜将聚焦光点有规律地反射到物体某一层面，完成二维扫描。其优点是精度较高，常用于高精度测量。扫描速度比物体扫描有所提高，但仍然不快 。

(3)使用声光偏转元件进行扫描，通过改变声波输出频率进而改变光波的传输方向来实现扫描。其突出优点是扫描速度非常快，由美国研制的利用声光偏转器产生实时视频图像的扫描系统，扫描一幅二维图像只需1/30s，几乎做到了实时输出。

(4)Nipkow盘扫描，其扫描过程是通过旋转Nipkow盘而保持其他元件不动完成的，可以一次成像，速度非常快。但是由于成像光束是轴外光，所以必须对透镜的轴外像差进行校正，并且光能利用率很低 南昌显微镜性价比探针台显微镜的选型；

探针应用的显微镜STM和AFM的原理其实就是利用探针与样品间的距离进行测绘得到的样子，也可以说是根据样品与探针间测量得到的距离，将图像画下来的样子。当然，具体原理还是有点不一样的。为什么会有两种“探针型”的显微镜，STM显微镜因为需要测定电流，因此必须要求所测样品需要具有导电性，而AFM显微镜因为只需要测定相互作用力，因此不需要考虑测定电流，所以相比STM显微镜可以测定更多类型样品。而AFM的缺点则是其分辨率比STM要低，主要原因也是测量时候的原理及目前技术上的问题。首先测定形变是利用激光，在形变后激光的方向会发生偏折，因此测定的其实是激光的信息从而绘制的图像。

体视显微镜的原理及常见的体视显微镜的光路设计主要有两种：格里诺光路（GreenoughDesign）和伽利略光路（CMODesign）Greenough原理：两个相同的光学系统以10–16°的角度连接到同一支架。光路中的两个成像棱镜可确保图像直立并和实物的方向一致。常规使用的普通体视显微镜多数采用的是Greenough原理。伽利略光路原理：光学系统由两个平行的光束路径和一个共享的主要物镜组成，这就是为什么它被称为CMO（通用主要物镜）系统的原因。这种类型的体视显微镜具有可移动的观察管和可在管镜区域定制的通用配件，体视荧光附件就是其中重要的光学配件。伽利略光路的体视显微镜增加上体视荧光附件就可以升级为体视荧光显微镜，成为现代科学、再生医学、遗传学等领域重要的工具之一。 金相显微镜一般有明场、暗场、偏光、微分干涉这四种常见的观察方法；

显微镜使用注意事项：

▪显微镜样本一定要保持干净，如有盖片样本，一定要干净干燥，以免样本上的试剂污染物镜。

▪不要用手直接触摸光学部件的表面（如物镜，荧光滤块，目镜等）。

▪手动显微镜换物镜时，不要抓着物镜转，要转动物镜转盘。▪荧光光源金属卤化物灯使用时注意开关间隔少30分钟。

▪样本用油镜观察后，如还需用空气镜观察，要把样本上的油擦干净再观察，以免样本上的油污染空气镜。▪油镜观察时，请使用与显微镜配套的专业镜油，不要使用其他介质（香柏油等），使用完显微镜后，及时擦掉物镜上的镜油，比较好将其他物镜也清洁一遍。清洁液以无水乙醇为主。

▪调焦时，为避免镜头撞到样本，先将物镜调到离样本近端，然后在镜下向离物镜远端调焦到样本清晰。▪显微镜使用过程中，镜体、灯箱及电源等位置应无遮挡或覆盖，以免影响散热从而损耗显微镜寿命。

▪显微镜使用完后，等灯箱部分冷却后，再盖上防尘罩。

▪显微镜包含很多光学部件，避免显微镜碰撞，以保护光学系统。

▪显微镜属精密仪器，如需搬动，拆修，请联系蔡司专业人员。 显微镜的几种观察方式；上海金像显微镜

扫描探针显微镜的特点。金像显微镜调试

共聚焦显微镜技术下一步的研究重点应该集中在以下几点：1、更快的扫描速度目前共聚焦扫描速度受限于扫描设备的机械结构，要想获得更快的扫描速度只能牺（xi）牲分辨率。而很多生物过程非常迅速，目前仍然无法检测。2、更wan美的超高分辨率技术目前超高分辨率技术有STORM、PALM、STED和SSIM几种技术，分辨率从20～200nm不等，但是各种技术均有一定缺陷，例如在样品处理、Z轴方向、光毒性等方面还不近wan美，在实际观察中往往很难达到极限分辨率。3、更强的兼容性共聚焦显微镜技术涉及到多种激发方式，例如多光子和光片式观察，相干反斯托克斯拉曼散射在理论上可以公用一套激光系统。超高分辨率显微术可以搭配白激光技术。金像显微镜调试

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