酵母文库筛选:为了系统地揭示调控丛枝菌根共生的转录因子,研究者以51个水稻基因的启动子为诱饵,利用包含1570个水稻全长转录因子的文库进行了酵母单杂交筛选。这51个基因主要是已报道的参与或调节菌根共生的基因。文库筛选发现了一个由266个转录因子和47个启动子高度连接的网络,称之为"丛枝菌根共生酵母单杂交网络(YAM)"。平均每个启动子可以和4个转录因子互作。266个转录因子分属至少11个转录因子家族。72%(192个)的YAM转录因子在根中存在表达(FPKM>1)。与非定殖根相比,19个YAM转录因子在丛枝菌根***定殖的根中表达上调。酵母文库筛选研究多年建库与筛选经验验证。江西建库酵母文库报价
酵母双杂交筛选实验:为进一步了解LEA3蛋白在干旱胁迫下调控植物生长和增强抗旱性的分子机制,本研究以干旱胁迫条件下的棉花根茎叶为材料,构建了棉花干旱胁迫酵母文库。并以GhLEA3为诱饵,采用酵母双杂交筛选实验,从棉花酵母文库中筛选获得了GhLEA3互作蛋白,并对互作蛋白进行了GO和KEGG分析,发现其中的互作蛋白GhVDAC1主要参与钙信号通路和cGMP-PKG信号通路,互作蛋白Gh***A参与多种生物途径,如糖原生成和代谢途径。此外,GhVDAC1和Gh***A受干旱胁迫诱导表达***,且在GhLEA3敲除的棉株中表达量低于野生型棉株江西建库酵母文库报价为客户提供专业的技术服务专业医学课题标书论文一站式酵母双杂交。
水稻转录因子文库筛选服务:近几年,中国科学院分子植物科学***创新中心王二涛课题组在植物根瘤共生和菌根共生领域取得三项可以写入教科书级的研究成果。尤其是近两年,已经连续发表了Cell、Nature、MP和PNAS等高水平文章。此外,王二涛研究员也是第二届"科学探索奖"的获得者,肯定他在植物-微生物共生营养交换和菌根共生信号受体发现方面的贡献。2021年10月12日,分子植物***中心王二涛研究团队在Cell上发表题为“磷信号中枢网络调控菌根共生)”的封面论文。***绘制了水稻-丛枝菌根共生的转录调控网络,发现植物直接磷营养吸收途径(根途径)和共生磷营养吸收途径(共生途径)均是受到植物的磷信号网络统一调控,回答了菌根共生领域"自我调节"这一困扰领域的重要科学问题。欧易生物CEO肖云平先生也参与了此项研究。文中水稻转录因子文库筛选服务由欧易生物提供。
通过传统的酵母双杂交系统,以PtDAL1为诱饵,筛选样本来源于不同年龄段的油松cDNA文库。将获得的阳性克隆,10个一组,挑选到1个96孔板的PCR板孔中,获得10*96个阳性克隆的96孔板。以其中阳性克隆mix为模板,进行PCR扩增,并将所有的PCR产物进行纯化。使用纯化后的PCR产物,进行打断后构建二代测序文库,通过NGS测序,获得6G的阳性克隆数据。通过分析二代测序数据,获得阳性克隆基因信息(去冗余后获得135个互作子,包含21个TFs,2个TRs及酶类、热激蛋白、RNA结合等蛋白,部分见表1)。挑选重要的候选基因进行一对一验证(图2)。与拟南芥中同源基因AGL6的蛋白互作网络进行比对分析。对DAL1互作蛋白(DIPs)的基因表达谱、启动子中的顺势作用元件功能进行分析,并对DIPs进行GO注释(图3)。综合生信分析结果,构建针叶树老化途径的调控模型(图4)。结合自主优化的SMART和GATEWAY三框接头,可满足各种酵母双杂交文库构建要求。
酵母文库实验:MAPK级联***是植物防御病原体入侵信号传导过程中的关键事件,MAPKs靶向并磷酸化调节下游基因转录的转录因子,**终响应病原菌的侵入。WRKYs转录因子是MAPK级联的重要目标,在植物对各种病原体的抗性中起着关键作用。苹果如何响应炭疽菌入侵,将信号传导到细胞内,以及哪个转录因子负责协调促进GLS耐受均尚不清楚。本研究在苹果炭疽叶枯病易感品种“嘎拉”中发现了一个由苹果炭疽菌******诱导的转录因子MdWRKY17。在6个易感苹果种质中,MdWRKY17表达水平***高于6个耐受苹果种质,同时对应的水杨酸含量降低,证实了MdWRKY17介导的水杨酸降解在GLS耐受中的关键作用。酵母文库产品线由7个实验室组成,分别有RNA抽提室,RNA质检室、酵母建库室、筛库室等。江西建库酵母文库报价
从该技术开发以来,双杂交和三杂交报告基因数量从1个报告基因增加到了4个,降低了假阳性概率。江西建库酵母文库报价
酵母文库实验由欧易生物完成。2021 年 3 月,山东农业大学郝玉金教授为通讯作者,在 Plant Physiology 杂志(IF: 6.902)在线发表了题为“Interaction of BTB-TAZ protein MdBT2 and DELLA protein MdRGL3a regulates nitrate-mediated plant growth”的研究论文,深入探讨了硝酸盐介导的苹果生长调控分子机制。氮素是植物生长发育所必须的营养物质之一,硝酸盐是植物根系吸收无机氮的主要形式。除了营养功能,硝酸盐还可以通过多种信号途径来调节植物生长和发育过程。赤霉素(gibberellin,GA)是一种植物***,同样可以调控植物生长发育过程。然而,硝酸盐和赤霉素信号通路如何共同调节植物生长的确切分子机制仍知之甚少。江西建库酵母文库报价
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