酵母双杂交技术,自创建以来被广泛应用于蛋白互作研究领域,在生命科学的基础探秘研究中起着重要作用。然而该技术设计初衷,*是斯坦利先生为了完成申请学校经费的目的。该技术设计巧妙,它的许多优点在设计之初并未显现,反而在这么多年的高频使用和进一步开发利用过程中越发明显。(引用自MarcVidal&StanleyFields的“Theyeasttwo-hybridassay:stillfindingconnectionsafter25years”):(1)尽管酵母杂交技术揭示了蛋白质结合位点的详细信息,但操作简单。只需2个质粒+1个菌株即可完成,且有不同体系方便选择。(2)该技术利用比较好的DNA结合位...
水稻转录因子文库筛选服务:2021 年 10 月 12 日,中国科学院分子植物科学***创新中心王二涛研究员为通讯作者,在 Cell 上发表了题为“A phosphate starvation response-centered network regulates mycorrhizal symbiosis”的封面论文。文章***报道了水稻-丛枝菌根共生转录调控网络,发现植物直接营养吸收途径与通过丛枝菌根共生的间接营养吸收途径均受到磷信号网络的统一调控,回答了菌根共生领域“自我调节”这一困扰领域的重要科学问题。分子植物科学***创新中心博士后石进彩为***作者,欧易生物肖云平也参与了此项研究。...
酵母双杂交实验表明,PtMADS11 与 PtDAL1 之间存在直接的相互作用(图 C),并通过 BiFC、GST pull-down 得以证实(图 D-E)。为进一步研究在年龄信号调控中的作用机制,分别构建了过表达PtDAL1和PtMADS11的拟南芥。与对照相比,过表达PtDAL1***提前了拟南芥的营养-生殖时相转换(图A),证实PtDAL1在生殖起始和控制花***建立起到了关键作用。过表达PtMADS11植株在短日照下表现出早开花和花序结构过早终止,表明PtMADS11在开花调节和花序内分生组织命运起到调控作用。在拟南芥中利用年龄调控通路不同节点关键基因突变体进行功能互补实验,结果显示...
欧易酵母文库助力小麦根长抑制分子机制研究,近日,中国农业科学院作物科学研究所景蕊莲研究员、河南农业大学王翔副教授为共同通讯作者,在 Journal of Experimental Botany 杂志(IF: 6.992)在线发表了题为“Wheat SHORT ROOT LENGTH 1 gene TaSRL1 regulates root length in an auxin-dependent pathway”的研究论文,报道了小麦 TaSRL1 转录因子调控根长的分子机制。文章中酵母双杂交文库由欧易生物完成。根系是植物从土壤中吸收水分、养分和感知环境刺激的独特***。根系结构的优化有助于提...
酵母双杂交筛选实验:为进一步了解LEA3蛋白在干旱胁迫下调控植物生长和增强抗旱性的分子机制,本研究以干旱胁迫条件下的棉花根茎叶为材料,构建了棉花干旱胁迫酵母文库。并以GhLEA3为诱饵,采用酵母双杂交筛选实验,从棉花酵母文库中筛选获得了GhLEA3互作蛋白,并对互作蛋白进行了GO和KEGG分析,发现其中的互作蛋白GhVDAC1主要参与钙信号通路和cGMP-PKG信号通路,互作蛋白Gh***A参与多种生物途径,如糖原生成和代谢途径。此外,GhVDAC1和Gh***A受干旱胁迫诱导表达***,且在GhLEA3敲除的棉株中表达量低于野生型棉株21天定制自己的酵母文库,花一份钱拥有“四个库”。江西什么...
酵母文库实验本研究鉴定了一个可以与MdMYB9相互作用的蛋白MdTRB1。实验表明,MdTRB1可以正向调节花青素和原花青素的累积。MdTRB1与MdMYB9结合可以增强后者对下游基因的转录***活性。而MdTRB1与MdJAZ1的结合,可以干扰其与MdMYB9的互作,进而负向调控MdTRB1介导的对花青素和原花青素积累的促进作用。本研究表明,JAZ1-TRB1-MYB9复合物可以动态调控JA介导的花青素和原花青素的积累。本研究为进一步研究JA对花青素和原花青素生物合成的调节提供了新见解。酵母三杂交系统原理酵母双杂交文库构建。广东宣传酵母文库报价苹果酵母文库:黄酮醇是一类重要的次生代谢产物,在...
酵母双杂交筛选实验:为进一步了解LEA3蛋白在干旱胁迫下调控植物生长和增强抗旱性的分子机制,本研究以干旱胁迫条件下的棉花根茎叶为材料,构建了棉花干旱胁迫酵母文库。并以GhLEA3为诱饵,采用酵母双杂交筛选实验,从棉花酵母文库中筛选获得了GhLEA3互作蛋白,并对互作蛋白进行了GO和KEGG分析,发现其中的互作蛋白GhVDAC1主要参与钙信号通路和cGMP-PKG信号通路,互作蛋白Gh***A参与多种生物途径,如糖原生成和代谢途径。此外,GhVDAC1和Gh***A受干旱胁迫诱导表达***,且在GhLEA3敲除的棉株中表达量低于野生型棉株欧易生物21天极速建库,一个文库可以同时做单杂、双杂、三杂...
欧易酵母文库助力小麦根长抑制分子机制研究,近日,中国农业科学院作物科学研究所景蕊莲研究员、河南农业大学王翔副教授为共同通讯作者,在 Journal of Experimental Botany 杂志(IF: 6.992)在线发表了题为“小麦短根长度 1文章中酵母双杂交文库由欧易生物完成。本研究从小麦中克隆了一个新的 ERF 转录因子基因 TaSRL1 (SHORT ROOT LENGTH 1),该基因主要在根中表达。综上,本研究证明了 TaSRL1 在生长素依赖途径中作为 taPIN2 的直接调控因子,并通过与 TaTIFY9 相互作用,整合生长素和 JA 信号,抑制根的生长。TaSRL1-4...
苹果酵母文库:黄酮醇是一类重要的次生代谢产物,在防治人类**、*******、****血脂、抗氧化、抗病毒、抗过敏等方面发挥着重要作用。苹果除了含有多种维生素之外,还富含黄酮醇,这是"一日一苹果,医生远离我"的重要原因。了解黄酮醇的生物合成调控对改善苹果果实品质、提高苹果营养价值和提高苹果环境适应性具有重要意义。2022年2月,南京农业大学汪良驹团队在国际期刊分子科学上发表了题为“MdSCL8asaNegativeRegulatorParticipatesinALA-InducedFLS1toPromoteFlavonolAccumulationinApples”的研究论文,该研究发现MdSC...
酵母双杂交文库:植物从营养生长到生殖生长时相的不可逆转变,是植物生命周期中的一个关键阶段,是植物生存和繁殖至为关键的重要事件。在开始繁殖之前,许多多年生木本植物经历了一个相当漫长的幼年时期。与模式植物(如拟南芥)相比,针叶树通常具有非常长的生命周期。尽管在模式植物开花时间控制研究上取得相当大的进展,但对多年生树木,特别是针叶树年龄信号的调控机制仍知之甚少。因此,深入研究林木年龄信号对生殖发育过程的影响具有重要的理论和实践意义。酵母及其应用ppt课件 酵母及其应用 。江西应用酵母文库做什么欧易酵母文库助力小麦根研究,本研究克隆了小麦的 ERFs 转录因子家族 1 个成员 TaSRL1,它可以调控...
酵母文库实验:MAPK级联***是植物防御病原体入侵信号传导过程中的关键事件,MAPKs靶向并磷酸化调节下游基因转录的转录因子,**终响应病原菌的侵入。WRKYs转录因子是MAPK级联的重要目标,在植物对各种病原体的抗性中起着关键作用。苹果如何响应炭疽菌入侵,将信号传导到细胞内,以及哪个转录因子负责协调促进GLS耐受均尚不清楚。本研究在苹果炭疽叶枯病易感品种“嘎拉”中发现了一个由苹果炭疽菌******诱导的转录因子MdWRKY17。在6个易感苹果种质中,MdWRKY17表达水平***高于6个耐受苹果种质,同时对应的水杨酸含量降低,证实了MdWRKY17介导的水杨酸降解在GLS耐受中的关键作用。...
母文库实验由欧易生物完成。2021年3月16日,宁波大学陈剑平院士、孙宗涛研究员为共同通讯作者,在PNAS杂志(IF:9.412)在线发表了题为“AclassofindependentlyevolvedtranscriptionalrepressorsinplantRNAvirusesfacilitatesviralinfectionandvectorfeeding”的研究论文,深入报道了在不同植物RNA病毒中一种***存在的、通过劫持茉莉酸信号途径以协同促进病毒传播和介体昆虫摄食的新机制。植物病毒基因组通常*编码少数几个蛋白,它们必需依赖寄主植物才能完成自身的侵染和增殖。因此植物病毒往往通过...
欧易酵母文库助力小麦根长抑制分子机制研究,近日,中国农业科学院作物科学研究所景蕊莲研究员、河南农业大学王翔副教授为共同通讯作者,在 Journal of Experimental Botany 杂志(IF: 6.992)在线发表了题为“小麦短根长度 1文章中酵母双杂交文库由欧易生物完成。本研究从小麦中克隆了一个新的 ERF 转录因子基因 TaSRL1 (SHORT ROOT LENGTH 1),该基因主要在根中表达。综上,本研究证明了 TaSRL1 在生长素依赖途径中作为 taPIN2 的直接调控因子,并通过与 TaTIFY9 相互作用,整合生长素和 JA 信号,抑制根的生长。TaSRL1-4...
欧易生物酵母文库技术发表的又一篇高水平研究论文。植物***茉莉酸(JA)参与植物许多发育过程的调控。JAZ蛋白是茉莉酸信号反应的阻遏物,通过抑制JA转录调节剂来负向调节JA信号。花青素和原花青素是种子、叶、花和果实中重要的植物次生代谢产物,可充当抗氧化剂,帮助***活性氧和对**老,对人类健康具有重要价值。已有研究表明,花青素和原花青素的生物合成基因的转录受MYB、basichelix-loop-helix(bHLH)及WD40蛋白的调控。其中,苹果MYB转录因子MdMYB9参与调控JA介导的花青素和原花青素的生物合成,但其分子机制仍有待深入研究。一个专属自己的酵母文库才是正确的打开方式。山东...
酵母单杂交结果显示,磷酸盐饥饿响应因子OsPHR1/2/3可以***51个目标启动子中的25个,包括OsRAM1、OsRAD1、OsWRI5A等。OsRAM1、OsRAD1、OsWRI5A自身又可以调控许多菌根共生相关基因的表达(图A)。对丛枝菌根共生响应基因启动子序列预测分析显示,有78个转录因子被富集,87%的菌根共生响应基因受到OsPHR1/2/3的调控,其中42%受到OsPHR1/2/3的直接调控。因此推测OsPHR1/2/3可能是菌根共生调控网络中的一个关键调控枢纽(图A-B)。EMSA和荧光素酶报告实验证实,OsPHR12可以直接结合并***OsRAM1、OsWRI5A、OsPT1...
文章中酵母双杂交文库由欧易生物协助完成。近日,上海交通大学/复旦-交大-诺丁汉植物生物技术研发中心主任唐克轩课题组在New Phytologist(IF:8.512)发表了题为“AaWRKY9 contributes to light- and jasmonate-mediated to regulate the biosynthesis of artemisinin in Artemisia annua”的研究论文,揭示了青蒿转录因子AaWRKY9有助于光和茉莉酸信号所介导的青蒿素生物合成调控的新型分子机制,本研究通过蓝/红光诱导青蒿中青蒿素生物合成基因的表达,使用转录组分析确定了一个WRK...
酵母双杂交文库:疟疾是人类**古老的疾病之一,每年4月25日是世界防治疟疾日,疟疾目前仍是公众健康所面临的**严重威胁之一。基于青蒿素的联合处理法(ACTs)是WHO推荐的比较好处理方案。因发现具有抗疟作用的青蒿素,挽救了数百万人的生命,屠呦呦教授获得了2015年诺贝尔生理或医学奖,从青蒿中分离出的青蒿素被推荐作为抗疟疾的优先药物。之前研究表明,茉莉酸(JA)介导促成的青蒿素积累依赖于光,转录因子HY5也通过参与光信号调控促进青蒿素合成。然而,光与JA相互作用机制及其对青蒿素生物合成调控的潜在机理仍未得到解决。酵母文库质量检测酵母基因功能鉴定。北京生物技术酵母文库做什么酵母文库实验由欧易生物完...
酵母双杂交还可以这么用?Y2H-seq 揭示不老松年龄。***小欧又给大家带来了一篇酵母双杂交结合高通量测序技术的应用文章。北京林业大学钮世辉老师团队,在传统的酵母双杂交技术流程基础上,巧妙的结合了NGS技术,优化建立了Y2H-seq技术,**缩短了常规的筛库后测序验证周期,节约了实验成本。文章中应用Y2H-seq技术,对不老松年龄密码进行了有趣的研究,其中所用酵母双杂交文库由欧易生物协助完成。众所周知,酵母双杂交技术是研究蛋白相互作用的利器。目前已知的蛋白质相互作用至少有一半是通过酵母双杂交技术发现的。但是做过酵母杂交实验的小伙伴也都知道蛋白筛选较容易,但是筛选后,想知道获得的阳性克隆都对应...
酵母双杂交技术,自创建以来被广泛应用于蛋白互作研究领域,在生命科学的基础探秘研究中起着重要作用。然而该技术设计初衷,*是斯坦利先生为了完成申请学校经费的目的。该技术设计巧妙,它的许多优点在设计之初并未显现,反而在这么多年的高频使用和进一步开发利用过程中越发明显。(引用自MarcVidal&StanleyFields的“Theyeasttwo-hybridassay:stillfindingconnectionsafter25years”):(1)尽管酵母杂交技术揭示了蛋白质结合位点的详细信息,但操作简单。只需2个质粒+1个菌株即可完成,且有不同体系方便选择。(2)该技术利用比较好的DNA结合位...
酵母双杂交文库:疟疾是人类**古老的疾病之一,每年4月25日是世界防治疟疾日,疟疾目前仍是公众健康所面临的**严重威胁之一。基于青蒿素的联合处理法(ACTs)是WHO推荐的比较好处理方案。因发现具有抗疟作用的青蒿素,挽救了数百万人的生命,屠呦呦教授获得了2015年诺贝尔生理或医学奖,从青蒿中分离出的青蒿素被推荐作为抗疟疾的优先药物。之前研究表明,茉莉酸(JA)介导促成的青蒿素积累依赖于光,转录因子HY5也通过参与光信号调控促进青蒿素合成。然而,光与JA相互作用机制及其对青蒿素生物合成调控的潜在机理仍未得到解决。酵母文库酵母双杂交筛库个性化定制研究方案。四川技术酵母文库做什么本研究通过酵母双杂交...
酵母双杂交文库:本研究通过7个树龄的油松样品转录组测序,鉴定到一个与年龄信号***相关的基因模块,该模块包含33个转录因子,包括SOC1-like、DAL1等。油松和晚坐果白皮松突变体中的基因表达模式分析显示,PtMADS11与生殖能力之间存在紧密相关性。酵母双杂交显示,MADS11和DAL1直接相关作用以参与对年龄信号的调控。过表达PtMADS11、PDAL1可以部分挽救拟南芥中miR156过表达或spl突变导致的开花延迟缺陷。只有PtMADS11可以挽救ft突变体中的开花缺陷,表明它与PtDAL1在拟南芥开花调控网络中发挥了不同的作用。根据每个客户的研究目标和内容灵活定制研究方案。既能提供...
水稻转录因子文库筛选服务:2021 年 10 月 12 日,中国科学院分子植物科学***创新中心王二涛研究员为通讯作者,在 Cell 上发表了题为“A phosphate starvation response-centered network regulates mycorrhizal symbiosis”的封面论文。文章***报道了水稻-丛枝菌根共生转录调控网络,发现植物直接营养吸收途径与通过丛枝菌根共生的间接营养吸收途径均受到磷信号网络的统一调控,回答了菌根共生领域“自我调节”这一困扰领域的重要科学问题。分子植物科学***创新中心博士后石进彩为***作者,欧易生物肖云平也参与了此项研究。...
酵母文库研究:棉花是世界上天然纤维的主要来源。近年来,气候变化给植物带来的干旱、高盐等渗透胁迫,使棉花产量稳步下降。为适应变化莫测的气候,植物不断进化出复杂而有组织的应对非生物胁迫的反应机制,其中数千个抗性相关基因间的相互作用,在提高植物的抗旱性和耐盐性中发挥着重要作用。功能基因组学研究表明,植物胚胎发育晚期丰富蛋白(LEA)就是这样一种基因,它在植物发育过程中,面对多种环境胁迫时均有表达,对提高植物的抗旱性和耐盐性具有重要作用。2022年3月,中国农业科学院棉花研究所在国际期刊上发表了BiologicalMacromolecules上发表了题为“Lateembryogenesisabunda...
小欧从2018年即开始关注酵母杂交与高通量测序相结合的技术发展,如2017年CaoGang老师等发表的RLL-Y2H技术,实现了文库筛文库可能,该技术通过对酵母双杂常用载体的改造,并结合高通量测序,可直接获得AD-BD互作蛋白对。所用方法相当巧妙,感兴趣的同学请点击《当酵母双杂交遇到高通量测序》。钮老师团队之前的研究已经鉴定了DAL1作为一种保守的针叶树年龄生物标记基因,在油松从营养生长到生殖生长的时相转变过程中起重要作用。为了进一步理解年龄效应如何驱动针叶树的发育,阐明与DAL1相关的蛋白互作网络很关键。钮老师团队利用传统的Y2H筛选技术结合NGS测序技术,优化得到了Y2H-seq技术,与传...
文章中酵母文库实验由欧易生物完成。2021 年 3 月,扬州大学陈忱教授为通讯作者,在 The Plant Journal 杂志(IF: 6.141)在线发表了题为“The rice LEC1-like transcription factor OsNF-YB9 interacts with SPK, an endosperm specific sucrose synthase protein kinase, and functions in seed development”的研究论文,报道了 OsNF-YB9 在调控水稻种子发育中的作用机制。NF-Y转录因子家族成员LEC1在拟南芥胚胎发生...
目前,欧易生物负责该水稻转录因子文库的维护和保存工作,并对广大水稻科研工作者提供转录因子筛选服务。如去年欧易生物助力中国科学院分子植物科学***创新中心的王二涛老师应用该文库对水稻-丛枝菌根进行了深入研究,成功构建了水稻-丛枝菌转录调控网络,结果发表于《Cell》封面。截至文章发表,该文库已收录了1683个水稻转录因子,隶属于54个家族,覆盖预测的水稻转录因子总量的70%。文库中水稻转录因子的a基因信息来源于PlantTFDB和KOME数据库。文库载体使用pGADT7,酵母菌株使用Y187,每一个转录因子菌株**保存于96孔板中。酵母文库筛库 在酵母双杂交系统中 。福建应用酵母文库报价酵母双杂...
进行了酵母双杂交文库的筛选,结果显示钙依赖的种子特异性蛋白激酶SPK可以与OsNF-YB9相互作用,分段截取互作验证显示OsNF-YB9的N端是互作所必须的(图a-b),并通过双荧光分子互补实验、BiFC、体外GST-pulldown实验得以证实(图c-e)。亚细胞定位显示SPK主要在细胞质中表达,OsNF-YB9在细胞质和细胞核中都有表达,共表达SPK和OsNF-YB9***促进了OsNF-YB9的入核(图f),表明SPK和OsNF-YB9的相互作用可能促进了OsNF-YB9从细胞质向细胞核的运输。RT-PCR显示SPK在发育中的种子中高表达,在5DAF开始***,并在10-30DAF维持高...
蛋白被泛素化后(即蛋白上结合了泛素),意味着将要被运往蛋白酶体降解,一般用于降解细胞内老弱病残蛋白,再回收利用。同时也被用于排除异己,抵御外敌。该过程需要一系列酶介导:泛素***酶(E1)、泛素偶联酶(E2)和泛素E3连接酶(E3)。其中E3是起特异性识别作用的,即决定谁该被降解,不能把好同志降解掉。所以E3基因很多,植物中主要有四种类型:HECT、RING、U-box和CRLs。其中CRLs是植物中含量**丰富的E3连接酶。本研究中,通过酵母双杂交筛选到的标题蛋白MdBT2,整好是CRLs亚家族之一。因此作者推测MdBT2可能在与ApNMV1a结合后,起到了促进其泛素化和降解的作用。百种酵母...
利用酵母文库进行双杂交筛选,结果显示 MdBT2 可以与 MdRGL3a 结合。MdRGL3a 编码 GA 信号阻遏物 DELLA 蛋白,主要分布于细胞核中。MdRGL3a 对于 GA 处理非常敏感,可以引起其发生降解,PAC 处理可以提高其稳定性。进一步的酵母一对一杂交验证实验表明,两者的结合依赖于 MdBT2 的 BTB 和 BACK 结构域、MdRGL3a 的 LHRI 和 SAW motif(图 A-B)。并通过 GST pull-down、BiFC 实验也证实了 MdBT2与 MdRGL3a 的结合(图 C-D)。细胞外降解实验显示,与对照相比,MdRGL3a 与过表达 MdBT2 ...
进行了酵母双杂交筛选实验,结果显示 MdMPK3 可以与 MdWRKY17 相互作用(图 C),并且通过 BiFC、Co-IP 得以证实(图 D-E)。MdMPK3 的激酶活性水平在炭疽菌***后也***上升(图 B)。进一步的 BiFC 和 Co-IP 表明,MdMEK4 可以与 MdMPK3 相互作用(图 F-G)。体外激酶试验表明,MdWRKY17 能够被MdMEK4- MdMPK3 级联磷酸化(图 H)。综上,MdMEK4-MdMPK3 级联磷酸化 MdWRKY17。与对照相比,MdWRKY17过表达植株中水杨酸含量降低,而RNAiMdWRKY17植株中水杨酸含量升高(图A)。结合自主...