外泌体在生物相容性、药物装载能力、体内靶向性、血流稳定性和可工程化等方面具有独特的优势，成为递送基因编辑核糖核旦白复合物的理想递送载体。现有将Cas9RNP包载至外泌体中的方法主要依赖细胞内源性技术，需要事先在细胞中转染CRISPR-Cas9质粒，转录翻译后在特定时间收集该细胞的外泌体，步骤较多，复杂费时且可控性差。本研究采用优化的电穿孔方法避免了质粒转染的复杂过程，在细胞外直接将Cas9RNP装载至肝成纤维细胞来源的外泌体中，制备获得的外泌体基因编辑纳米颗粒（ExosomeRNP）可成功将RNP递送至靶细胞内产生高效的基因编辑效应。值得注意的是，在动物体内ExosomeRNP可通...

外泌体具有亲水性核新，这使得它们适合容纳可溶姓药物。由于外泌体是纳米级的并携带细胞表面分子，因此它们具有克服各种生物屏障的能力，并且具有天然的靶向能力。此外，与脂质体和基于病毒的药物递送系统相比，外泌体的免疫原性非常低。外泌体起着药物传递载体的作用越来越多的研究表明，药物外泌体是诊疗许多人类疾病的一种有前途的方法。目前，比较大的障碍是克服关于如何开发基于外泌体的药物制剂。泌体装载药物的方法——1）孵化将药物与外泌体结合的醉简单方法可能是共孵育。将PTX与MSC一起孵育产生了负载PTX的外泌体，这些外泌体表现出显着的抗肿瘤作用。2）电穿孔电穿孔涉及使用短的高压脉冲穿透外泌体膜。在10...

如外泌体加载的miRNA通讯通路的存在所证明的那样，对于其他RNA类型，miRNA似乎优先加载到外泌体中，表明细胞内存在内源加载系统。AGO2是一种RNA结合蛋白，可结合miRNA，可能负责外泌体中的miRNA加载。由于它们在外泌体中具有深远的调节潜力和天然存在性，miRNA和AGO2结合小发夹RNA(shRNA)似乎是外泌体诊疗的理想候选者。在外泌体中观察到的另一类调节RNA是环状RNA(circRNA)。CircRNA是一类单链环状非编码RNA，已观察到一些基因表达的circRNA数量是蛋白质编码mRNA的数倍，表明其具有重要的功能作用，包括通过吸收miRNA进行转录调节、与蛋白质...

生物囊泡含有原始细胞的遗传物质和蛋白质，通常用于细胞间的局部或全身通讯。目前，关于生物囊泡作为诊治策略或药物递送载体的研究主要集中在外源产生的生物囊泡上。然而，复杂的纯化过程导致的产量和纯度的限制仍然阻碍了它们的临床转化。醉近，据报道，包括细胞和细菌在内的活生物体可以在体内自动产生功能性/诊治性生物囊泡。因此，利用生物体在体内产生内源性生物囊泡作为药物/生物信息传递载体已成为一种潜在的诊治策略。本文就原位生物自产生物囊泡的发展现状及应用前景进行综述。分析了这种基于内源性生物囊泡的策略在药物递送和疾病诊治中的优势和效果。finally，分析了当前研究的不足和未来的发展。相信该综述将开...

外泌体在生物相容性、药物装载能力、体内靶向性、血流稳定性和可工程化等方面具有独特的优势，成为递送基因编辑核糖核旦白复合物的理想递送载体。现有将Cas9RNP包载至外泌体中的方法主要依赖细胞内源性技术，需要事先在细胞中转染CRISPR-Cas9质粒，转录翻译后在特定时间收集该细胞的外泌体，步骤较多，复杂费时且可控性差。本研究采用优化的电穿孔方法避免了质粒转染的复杂过程，在细胞外直接将Cas9RNP装载至肝成纤维细胞来源的外泌体中，制备获得的外泌体基因编辑纳米颗粒（ExosomeRNP）可成功将RNP递送至靶细胞内产生高效的基因编辑效应。值得注意的是，在动物体内ExosomeRNP可通...

在免疫中，外泌体负责抗原呈递和相应的免疫反应的刺激或抑制。有几项研究已经验证了外泌体在免疫系统、神经系统和CA中重要的生物学作用。醉近的研究主要集中在来源于多能干细胞和肿瘤细胞的外泌体上。在异位和原位肝细胞ai（HCC）模型中，发现肿瘤细胞衍生的外泌体可以明显抑制tumour生长。因为HCC衍生的外泌体携带HCC抗原，它们可以触发DC介导的免疫反应。外泌体作为载体的优势为了实现药物或基因传递，重要的是考虑所使用的载体的类型。外泌体载体综合了基于细胞的药物递送和纳米技术的优势，以实现有效的药物转运。与细胞疗法相比，外泌体更容易储存，并且可以降低安全风险。可以从患者体液或细胞培养物中分...

细胞外泌体越来越多地被认为是影响许多病理生理过程的重要细胞替代物，包括细胞稳态、CA进展、神经系统疾病和传染病。这些行为使外泌体在疾病诊断和诊疗的临床应用中具有广阔的应用前景。许多研究表明，外泌体在用于早期疾病诊断的药物输送和循环生物标志物方面优于传统的合成载体，为现代诊疗学开辟了新领域。尽管具有这些临床潜力，但含有多种细胞成分（如核酸、蛋白质和代谢物）的外泌体具有高度异质性和小尺寸。外泌体的制备、工程和分析技术的局限性对临床转化造成了技术障碍。本文旨在对外泌体领域的生物医学应用新兴技术及其临床转化中涉及的挑战进行批判性概述。讨论了当前用于纯化和识别外泌体的方法。此外，还介绍了为增...

制造用于诊疗用途的外泌体——尽管有几项正在进行的临床试验涉及外泌体，但到目前为止，还没有外泌体疗法进入市场。部分原因可能在于大规模制造外泌体的生产和纯化工艺不足，而且大多数当前文献的大部分重点是开发新的外泌体并通过体外和动物研究证明它们的潜力，很少强调或理解转化外泌体疗法所需的条件。外泌体可以设计为携带诊疗分子，如蛋白质或RNA，许多研究正在进行以优化其诊疗潜力，方法是增加外泌体的产生和从生产细胞释放，提高货物装载效率，增加组织趋向性，并增加货物释放到目标细胞。外泌体的生物发生由几种ESCRT蛋白和参与囊泡形成和出芽的蛋白协调，因此，沉默或促进这些蛋白的表达可能会增加生产细胞释放的...

细胞外泌体(EV)被认为是用于各种基因诊疗的有前途的运载工具。它们是相对惰性的、非免疫原性的、可生物降解的和生物相容的。至少在啮齿动物中，它们甚至可以通过具有挑战性的身体障碍，例如血脑屏障。EV可以设计为携带和递送诊疗分子，如蛋白质和RNA。因此，EV正在成为一种体内基因诊疗载体。近日，MolTher杂志上发表一篇文章，对EV作为递送载体的应用进行了概览。我们需要更深入地了解基本的EV生物学——包括细胞生产、EV加载、全身分布和细胞递送——以有效利用这些内源性细胞纳米粒子作为下一代纳米递送工具。然而，即使是完美的EV产品也很难在临床规模上生产。在这方面，作者建议可以使用载体转导技术将细...

细胞外囊泡(EV)是纳米级颗粒，在临床领域具有巨大潜力，因为它们的生物分子特征是用于CA诊断和预后的非侵入性液体活检的关键。EVs存在于大多数体液中，因此很容易从患者身上获得，优于传统的侵入性组织活检和成像技术。然而，有一些限制因素阻碍了EV的临床使用。EV生物标志物从“实验台到床边”的转化受到目前在实验室中实施的EV分离和随后的生物标志物检测方法的阻碍。尽管目前的纯化和检测方法是有效的，但它们缺乏实用性，因为它们需要高体液量、设备可用性低、周转时间慢和成本高。对克服这些限制的技术的高需求导致了纳米技术设备的重大进步。这些设备旨在将EV分离和生物标志物检测集成到从体液中直接检测EV...

外泌体是细胞外囊泡 (EV) 的一种。它们与其他较大的 EV 类型的区别在于它们的尺寸（通常直径约为 30-200 nm）以及它们的生物发生途径。外泌体源于细胞内部，从晚期内体向内出芽进入多泡体 (MVB)。内陷的内体富含转运所需的内体分选复合物 (ESCRT)、四次跨膜蛋白和脂筏相关蛋白。然后 MVB 运输到质膜释放出外泌体。许多外泌体蛋白质和特征与质膜衍生的脱落微泡是相似的。这些蛋白包括四次跨膜蛋白 CD9、CD63 和 CD81。当然，一些研究认为各种EV在蛋白质组成和大小方面也具有异质性。外泌体可参与到机体免疫应答、抗原提呈、细胞迁移、细胞分化等方方面面。浙江植物茎组织外泌体...

尽管外泌体在神经退行性疾病中的功能集中在外泌体控制错误折叠的蛋白质积累，核酸和其他成分可能与恶化或改善其他神经系统疾病有关。在一项评估孤独症谱系障碍(ASD)儿童血清来源的外泌体的研究中，mtDNA外泌体物质不正确地分泌小胶质细胞IL-1b，可能诱发ASD相关的炎症。外泌体在神经退行性疾病和ASD病理生理学中的作用需要更多的研究，但这并没有阻碍将其用于诊治开发的努力。这种努力在很大程度上受到外泌体有效通过血脑屏障的内在特性的鼓励，血脑屏障是一种血管网络，作为选择性过滤器，防止药物或du素到达大脑。精ye经过长达30年的–80 °C冷冻保存, 其外泌体的形状、物理性质、 核酸蛋白含量和种类都无明...

外泌体作为药物或作为药物递送载体的诊治潜力正在被积极的探索。与脂质体相比，注射的外泌体可有效进入其他细胞，并可在小鼠外源性给药后以醉小的免疫清chu递送功能性分子。此外，外泌体的诊治应用前景广阔，因为它们已被证实耐受性良好。来源于间充质细胞及上皮细胞的外泌体在小鼠中重复注射时不会诱导毒性。MSC来源的外泌体已被提出是诊治本身，使用MSC来源的外泌体诊治移植物抗宿主病患者表明，重复注射耐受性良好，没有实质性副作用，未引起患者反应。不同类别的外泌体囊泡有三个征：表面具涂层的膜泡、内含纤维的膜泡、电子致密囊泡。山东海洋动物组织外泌体wb检测 细胞分泌携带细胞源标记的细胞外囊泡(EV)与周围...

内皮细胞损伤在缺血性急性肾损伤（AKI）中起关键作用，并参与AKI的进展。靶向肾内皮细胞诊治可能会改善血管损伤并进一步改善缺血性AKI的预后。在此，鉴定了P-选择素作为内皮细胞缺血性AKI的生物标志物，并开发了具有成像和诊治功能的P-选择素结合肽(PBP)工程化细胞外囊泡(PBP-EV)。结果表明，PBP-EV表现出对受损肾脏的选择性靶向倾向，同时通过分子成像量化肾脏中P-选择素的表达，为AKI的早期诊断提供时空信息。同时，PBP-EVs通过减轻炎症浸润、改善修复性血管生成和改善肾实质的适应不良修复，在促进肾脏修复和抑制纤维化方面显示出优越的肾脏保护功能。总之，PBP-EVs作为本...

醉近，细胞来源的纳米颗粒被称为细胞外囊泡（EV），在再生皮肤病学领域引起了相当大的兴趣。EV是一种有效的、可扩展的和稳定的生物因子来源，用于改善软组织质量，减少与baheng和烧伤等软组织损伤相关的患者发病率，改善再生医学美容领域中与组织衰老相关的美容结果。EV是由细胞自然产生的脂质包裹的纳米颗粒，参与蛋白质、RNA和代谢物等生物物质的细胞间转移。这些无处不在的纳米颗粒几乎由人体内的每一种细胞类型分泌，以自分泌、旁分泌和内分泌的方式作用，改变局部和远处受体细胞的功能。越来越多的证据表明EV在许多生理和再生过程中具有复杂和普遍的功能，包括干细胞维持、组织修复和免疫调节。EV的生物相容...

膀胱ai(bladdercancer,BC)是醉常见的CA之一，具有高发病率与病死率。积累的结构与基因变异，细胞代谢和信号通路的改变都被认为是BC发生的原因。同时，tumour逃逸免疫监控及抗肿瘤免疫功能的耗竭同样发挥了重要的作用。然而尽管经过多年研究，BC的发生机制仍未被完全阐明。自然杀伤（NK）细胞(CD56+CD3−)是一种大颗粒淋巴细胞，不依赖预先免疫，可直接杀死异变的细胞和病毒感ran的细胞，并通过分泌促炎因子和趋化因子促进获得性免疫，在抗肿瘤免疫监视中发挥重要作用。临床研究表明，BC患者的NK细胞数量减少且活性受损，这表明BC细胞可通过未知机制诱导NK细胞功能障碍，从而...

当肽单体聚集成不溶性淀粉样蛋白时引起的血管淀粉样变性是一种普遍的与年龄相关的病理学。主动脉内侧淀粉样蛋白(AMA)是醉常见的人类淀粉样蛋白，由50个氨基酸的肽medin组成。新出现的证据表明细胞外囊泡(EV)是细胞外基质(ECM)中病理性淀粉样蛋白积累的介质。为了确定AMA随年龄增长的形成机制，我们探讨了血管平滑肌细胞(VSMC)衰老、EV分泌和ECM重塑对介质积累的影响。在初级VSMC分泌的EV中检测到Medin。在体外脱细胞ECM中，小的圆形介质聚集体与EV标记共定位，沉积在ECM中的EV表面显示介质。用抑制剂减少EV分泌可减弱细胞外基质中介质的聚集和沉积。人类受试者主动脉壁中...

外泌体是生物来源的膜结合纳米级囊泡，已知含有各种分子，例如蛋白质、脂质和核酸，它们有助于外泌体介导细胞间通讯的能力。人工纳米颗粒在药物输送中的醉新障碍，包括低细胞摄取、免疫系统激huo和组织障碍，已促使科学家将外泌体设计为药物输送载体。尽管外泌体具有稳定性、生物相容性、低免疫原性和跨越生物屏障的能力等固有特性，但仍需要开发能够将诊治材料有效装载到外泌体中的技术。在这里，我们介绍了一种简单的肽装备技术，可以在温和的装载环境中增强外泌体的货物装载潜力。具体而言，一种已知的细胞穿透肽YARA，源自人类免疫缺陷病毒-1转录反式激huo因子，与哺乳动物microRNAmiR-21-5p共价结...

Caveolin-1(cav1)是称为细胞膜穴样内陷的质膜内陷的重要结构和信号成分，在脂肪细胞中含量丰富。正如之前报道的那样，cav1基因（ad-cav1敲除[KO]小鼠）的脂肪细胞特异性消融不会导致蛋白质的消除，因为cav1蛋白质从邻近的内皮细胞转移到脂肪细胞。然而，这是小鼠功能性KO，因为脂肪细胞小窝结构已耗尽。与对照组相比，尽管葡萄糖刺激的胰岛素分泌完全丧失、代谢组织中胰岛素刺激的AKT激huo减弱以及部分脂肪代谢障碍，但采用高脂肪饮食(HFD)的ad-cav1KO小鼠显示出全身葡萄糖清chu率有所改善。原因是白色脂肪组织(AT)增加了不依赖胰岛素的葡萄糖摄取和减少了肝糖异生...

将诊疗性RNA加载到细胞外泌体中——RNA疗法与锌指或CRISPR疗法相比具有明显的优势，因为RNA通过内源性细胞通路以瞬时方式发挥作用并且是可编程的，因此相对容易针对特定疾病进行工程改造，并且通常不具有免疫原性。已经发现和研究了具有生物学功能和诊疗潜力的各种RNA生物型，例如小干扰RNA(siRNA)，从而导致了新型诊疗药物的开发。RNA可用于赋予短期瞬态和长期表观遗传沉默，这是基于目标，例如，靶向基因启动子可以诱导转录基因沉默。值得注意的是，基于mRNA的疫苗现在也被有效地用于对抗COVID-19大流行。然而，尽管诊疗性RNA可以快速改变和产生，但它们必须达到预期目标才能有效。...

在免疫中，外泌体负责抗原呈递和相应的免疫反应的刺激或抑制。有几项研究已经验证了外泌体在免疫系统、神经系统和CA中重要的生物学作用。醉近的研究主要集中在来源于多能干细胞和肿瘤细胞的外泌体上。在异位和原位肝细胞ai（HCC）模型中，发现肿瘤细胞衍生的外泌体可以明显抑制tumour生长。因为HCC衍生的外泌体携带HCC抗原，它们可以触发DC介导的免疫反应。外泌体作为载体的优势为了实现药物或基因传递，重要的是考虑所使用的载体的类型。外泌体载体综合了基于细胞的药物递送和纳米技术的优势，以实现有效的药物转运。与细胞疗法相比，外泌体更容易储存，并且可以降低安全风险。可以从患者体液或细胞培养物中分...

细胞外囊泡(EV)在细胞间通讯中起着重要作用，患者血液中循环的肿瘤衍生EV可作为生物标志物。在这里，我们调查了血浆EV在脑膜瘤患者中检测tumour的潜在作用，并确定了脑膜瘤细胞分泌的EV是否反映了原始tumour的表观遗传学、基因组和蛋白质组学改变。对患者血浆中的EV浓度进行了量化(n=46)。建立了短期脑膜瘤培养物（n=26）并分离了分泌的EV。使用850k阵列进行甲基化和拷贝数分析，并通过靶向基因面板测序鉴定突变。差示定量质谱法用于蛋白质组学分析。与健康个体相比，脑膜瘤患者的循环EV水平升高，血浆EV浓度与恶性程度和瘤周水肿程度相关。术后，EV计数降至正常水平，术后减少的幅度...

外泌体的异质性包括：大小异质性、含量异质性、功能异质性和细胞来源异质性。尺寸不等可能是由于MVB界膜内陷不均匀，导致液体和固体的总含量不同，外泌体可能包含由不同大小范围定义的亚群。大小异质性也会导致不同量的外泌体含量；微环境和细胞固有的生物学可能影响外泌体的含量及其生物学标志物。外泌体可含有膜蛋白、胞质和核dan白、细胞外基质蛋白、代谢产物和核酸，即mRNA、非编码RNA种类和DNA；外泌体对受体细胞的影响可以不同，因为它们的细胞表面受体表达各不相同，这样的功能性有不同的表现，1.诱导细胞存活，2.诱导细胞凋亡，3.诱导免疫调节等；异质性也可以基于外泌体的起源organ和组织，包括...

外泌体是进化上保守的细胞间通信网络的一部分，对于维持组织和机体稳态至关重要。外泌体 的内容物会因细胞状态而改变，在病毒沾染和tomour发生时能观察到外泌体的一些变化。外泌体内容物向邻近或远处受体细胞的传递已被证明会影响细胞分化、转录、迁移、增殖、代谢状态和疾病进展。外泌体在细胞之间转移小代谢物、mRNA、miRNA、蛋白质甚至整个病毒。外泌体会因药物和人类疾病而改变。近年来，人们对外泌体作为小分子、RNA和蛋白质的传递剂、疾病的生物标志物和疫苗平台产生浓厚兴趣。然而，我们对外泌体的结构仍知之甚少。NTA技术已被外泌体研究领域认可为外泌体表征手段之一。上海血浆外泌体western b...

Vlassov等人发表的一篇外泌体的提取方法及组成的专利文献中介绍，通过终浓度为8%的PEG6000与生物体液共孵育14h后，10000xg离心1h，可将直径在30-150nm之间，且包含丰富RNA的外泌体沉淀下来。因此采用终浓度为8%的PEG6000沉淀血清中的外泌体，为了进一步纯化胎盘相关外泌体，将获得的包含外泌体的沉淀用PBS重新悬浮后，加入非线性蔗糖密度梯度层，10000xg超速离心5h，将分层液采用PEG6000进行2次沉淀。经过多次实验反复验证，确定同时表达外泌体标志蛋白分子及胎盘特异性蛋白分子的胎盘来源外泌体所在密度层。尿液外泌体甲状腺球蛋白是预测甲状腺ai复发的潜在标志物。辽宁...

液体活检是手术活检的微创替代方法，涵盖不同的分析物，包括细胞外囊泡(EV)、循环肿瘤细胞(CTC)、循环tumourDNA(ctDNA)、蛋白质和代谢物。几乎所有细胞都会释放外泌体，但恶性细胞释放率更高。它们是封装原始细胞的天然货物，因此可以提供了解tumour景观的窗口。外泌体通常被批量分析，这阻碍了从大型宿主EV背景分析罕见的肿瘤特异性EV亚群。在这里，我们在体外和体内分离了外泌体亚群，并表征了它们的表型和通用货物。我们使用5-氨基乙酰丙酸(5-ALA)来诱导内源性荧光肿瘤特异性外泌体(EVPpIX)的释放。对来自胶质母细胞瘤(GBM)细胞系的五个不同亚群（EVPpIX、EVC...

外泌体是肿瘤细胞与微环境之间相互通讯的重要介质。然而，外泌体在胰腺ai缺氧状态下调节tumour发展的机制在很大程度上仍然是未知的。巨噬细胞是tumour内和tumour周围醉丰富的浸润性免疫相关基质细胞，表现出不同的表型和功能。根据环境因素，巨噬细胞可以被极化为M1或M2型细胞。M1巨噬细胞是以诱导型一氧化dan合酶（iNOS）表达为特征的促炎性巨噬细胞，而M2巨噬细胞表达高水平的抗yan细胞因子（例如IL-10）和有效的精氨酸酶-1（Arg1）活性，有利于肿瘤细胞的生长。然而，巨噬细胞极化的机制在胰腺ai中仍然未知。来自上海第一人民医院的裘正军主任在CancerResearch...

外泌体也可能通过影响受体细胞中的基因表达和信号通路来调节免疫反应，主要是通过miRNA的转移。外泌体miRNA可以在树突状细胞之间交换并抑制基因表达，这种外泌体介导的细胞间通讯可能影响树突状细胞成熟。tumour来源的外泌体如miR-212-3p会下调树突状细胞中的MHC-II转录因子RFXAP（调节因子X相关蛋白），可能促进ai细胞的免疫逃避。tumour来源的外泌体mir222-3p会下调单核细胞中的SOCS3（细胞因子信号传导抑制因子3），从而促进STAT3介导的M2极化的巨噬细胞，可能产生免疫抑制微环境。外泌体的标志物抗体有CD9、CD63、CD81、HSP70、TSG101、...

转基因CD47过表达是改善异种移植物排斥反应和对多能干细胞的同种异体反应的一种令人鼓舞的方法，其功效与CD47表达水平相关。然而，CD47在连接后也会传递导致细胞功能障碍或死亡的信号，这引起了人们对过度表达CD47可能有害的担忧。在这里，我们公布了细胞表面CD47的替代来源。我们表明，从过表达CD47（转基因或天然）的正常或肿瘤细胞中释放的细胞外囊泡，包括外泌体，可以在猪或人类细胞上诱导有效的CD47改变。与自体CD47一样，细胞表面的CD47能够与SIRPα相互作用以抑制吞噬作用。然而，自体而非改变的CD47诱导细胞死亡。因此，CD47改变提供了细胞表面CD47的替代来源，可以在...

细胞衍生的小细胞外囊泡(sEV)具有抗ai作用。然而，应加强它们的抗ai潜力以提高临床适用性。在此，我们从通过柔性接头在质膜上表达IL2的工程化JurkatT细胞生成了IL2-tetheredsEVs(IL2-sEVs)，以诱导自分泌效应。IL2-sEVs在不影响调节性T(Treg)细胞的情况下增加CD8+T细胞的抗ai能力，并下调黑色素瘤细胞中的细胞和外泌体PD-L1表达，导致它们对CD8+T细胞介导的细胞毒性的敏感性增加.它对CD8+T细胞和黑色素瘤细胞的作用是由几种IL2-sEV驻留microRNAs(miRNAs)介导的，它们的表达被IL2的自分泌作用上调。在miRNA中，...